大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒,大鼠PⅡNT 检测试剂盒大鼠催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT) 呈正相关。
大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)elisa试剂盒,大鼠PⅡNT 检测试剂盒
本试剂盒仅供研究使用。
使用目的:
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。
大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒,大鼠PⅡNT 检测试剂盒 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒,大鼠PⅡNT 检测试剂盒 试剂盒组成
大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒,大鼠PⅡNT 检测试剂盒 标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
曲线问题 | OD值不正常 试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃ 温度控制不好,控制正确温度 孵育时间不准确,控制孵育时间 洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干 阳光直射,对着风直接吹,避风避 酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm 抗体的稀释错误,正确的稀释抗体 水质问题,用娃哈哈矿泉水代替 |
白 板 | 洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液 少加液体(错加液体),正确的步骤加液体 |
无 梯 度 | 标准品也污染,换标准品点板 OD值不正常,控制温度时间在做一次 人为点板,不要点板 |
线 性 不 好 | OD值不正常,控制温度时间在做一次 |
大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒,大鼠PⅡNT 检测试剂盒 回收率:
1.空白管阳性高:样本本身就是阳性样本,换阴性样本做回收率空白管在实验中被污染,实验中防止交叉污染水质原因用,娃哈哈矿泉水代替。
2.偏 高:添加量不准确,JZ的添加量。添加浓度不适合,添加合适的浓。取液吹干量多,准确的取液吹。取到其它相层液体,取需用相吹。复溶液未稀释或加入量少,正确的稀释复溶。
3.偏 低:添加量不准确,JZ的添加量。添加浓度不适合,添加合适的浓。取液吹干量少,准确的取液吹。复溶液稀释错误或加入量多,正确的稀释复溶。
大鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒,大鼠PⅡNT 检测试剂盒 假阴、阳性:
1,水质原因:点复溶液验证,用娃哈哈矿泉水代替
2,实验操作原因:吸取到其它相吹干,准确的取液吹干。离心不彻底,延长离心时。
样本的污染,更换样本。乳化未处理完全,温浴(70℃)处理乳化现象
3,仪器试剂原因:离心管未清洗干净,正确的洗涤器具有机溶剂的影响,做试剂空白看影响结果
4,衍生化试剂原因(长时间衍生化试剂变质),更换衍生化试剂
5,与曲线好坏相关,,保证曲线的正常。
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