供应 人胎球蛋白A(Fetuin A)ELISA试剂盒,人胎球蛋白A 检测试剂盒

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本试剂盒仅供研究使用      标本：血清或者血浆

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。 

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一、试 剂 组 成

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二、注意事项

1.  此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。

2．  使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，

3．  浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。

4．  浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟

5．  若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。

6．  在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。

7．  加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。

8．  试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。

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三、实验前准备

1．使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。

2．准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头，医用蒸馏水等

3．浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液

4．浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液

5．用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。）

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四、操 作 步 骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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五、结 果 判 断

1. 仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值；

2、检测值范围：0－400IU/L

3、敏感度：1.0IU/L