利用活性筛选方法对细胞标记物定量---CELLMARKER模块 PathfinderTM CellScan与Wellscan系统与 CellMarker应用分析模块的组合,是模块化和快速高容量筛选设备的核心筛选技术,满足不同领域的需求如基础研究,药物研发和毒性筛选等。其主要特点之一是其的灵活性使其在同一仪器上对培养细胞或涂片,组织片段和微孔板进行分析(使用特殊的样品进样器)。此方法需与准确性、可靠性和实验室效率等标准相适应。强大的多色荧光图像系统,包含分析法则和全自动系统,可在实验进展和筛选环境方面获得高质量信息。目前运用PathfinderTM可检测的主要应用如下: 应用 | 检测参数 | 标记物 | 相关指数或参数 | 图例 | 细胞活性 | 细胞内DNA损伤或结构损伤 | Propidium Iodide, YOYO, MTT, trypan blue | 染色核的百分比 | | 彗星实验 | 毒理学研究DNA损伤 | 彗星 | 彗星特征:尾矩,慧星矩,片段移动,DNA含量 | | 细胞凋亡检测 | 诱导细胞死亡 | 凋亡标记物(TUNEL, Parp, Caspases, Annexin V.) | 凋亡细胞的百分比 | | 二次显型实验筛选的靶物实验 | 靶物验证 | 细胞骨架分析结构(微管蛋白α和γ 作为靶物用于毒理二次筛选) | 阳性细胞百分比(微管蛋白α和γ联合定位) | | 靶物实验二次筛选 | 导向检测 | Filopodia的延时记录 :微管蛋白二次筛选 | 形态学,结构学改变微管蛋白的聚合状态 | T0= 0 s,初始状态; T1=90s被改变的状态 T0 T1 | 显型检测 | 细胞毒性,DNA损伤感应,导向检测 | Rad 51和微管蛋白γ的DNA含量 | 联合定位信号数量,DNA ploïdy | 每个细胞联合定位信号数量 | 靶向鉴别 | 细胞毒性 | 有丝分裂和膜蛋白,DNA含量 | 阳性细胞的百分比,每个细胞周期活性细胞的百分比 | DNA直方图 | 绑定受体的目标识别 | 蛋白交互作用 | FRET(荧光共振能量转移) | 每个细胞联合定位信号百分比 | GFP YFP FRET | 细胞转运通道 | 细胞上生理,药物影响 | 细胞内离子浓度Ca2 , pH, Cl-, Na | 荧光信号相对时间的测量(/比率),在细胞群中为单独细胞选择感兴趣区域 | 技术指标:捕获,侦测和分析1000个细胞的总时间:少于3分钟,具体根据检测的类型 |