CD34,CD34抗体（细胞表面的唾液粘蛋白）

产品名称 CD34抗体（细胞表面的唾液粘蛋白）

缩    写 CD34

蛋 白 名 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34

规    格 0.1ml；0.2ml

免 疫 原 多肽

来    源 兔

特 异 性 抗人、大鼠、小鼠

克隆类型 多克隆

应    用 IH(P)免疫组化(石蜡)；IH(F)免疫组化(冰冻)；IC细胞免疫化学；WB免疫印迹

成    分 200μg/ml亲和纯化抗体，0.01M PBS，30%甘油。

保存条件 连续使用时4°C存储，保质期六个月；长期存储时建议分装为10ul以上小包装-20°C存储，并避免反复冻融，保质期一年。

背景资料 The protein encoded by this gene may play a role in the attachment of stem cells to the bone marrow extracellular matrix or to stromal cells. This single-pass membrane protein is highly glycosylated ａnd phosphorylated by protein kinase C. Two transcript variants encoding different isoforms have been found for this gene

酶联免疫吸附试验（ELISA）用来对一个特定的可溶性蛋白分子进行定性和定量分析，如血清中的特异性抗体或蛋白质的有无及浓度。此方法是利用了聚苯乙烯检测板吸附蛋白质或抗体的能力及抗体特异性结合靶抗原的能力。一般来说，此方法可通过检测实验样品在一定波长下的吸光度，再结合已知的抗原或抗体浓度标准曲线，计算出检测样品中此抗原或抗体的浓度。有常用的ELISA检测方法。

图 . 免疫印迹法。

免疫印迹法

是一种通过凝胶电泳分离蛋白质并通过电转移把蛋白质转移到吸附膜上。一经蛋白印迹后，即可通过特异性的标记抗体检测到相应蛋白质。

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）可用以检测已被SDS化学变性的蛋白。然而，某些特定的抗体不会再一个变性的蛋白质分子上识别其抗原表位，因此需要进行不含SDS的聚丙烯酰胺凝胶电泳。

蛋白印迹可以通过湿法或半干法进行。在前者，凝胶夹在印迹膜和各种过滤装置中间，然后把整个装置埋进一个装满三甘氨酸转移缓冲的电极槽中。在后者，夹在中间的凝胶周围只有少量的缓冲，然后封闭在电极板之间。虽然半干法转膜较快，但需要很好地拟合各部分的夹层配件，而湿法转膜很少会出现问题，可以尽量保持重复实验结果的一致性。此外，如果半干法转膜时间过长，较小分子量的蛋白质可能会从膜上转过。

转膜后，需对膜进行封闭，以减少非特异性蛋白结合，然后进行用一抗孵育膜，以研究感兴趣的目标蛋白。单克隆抗体通常具有更高的特异性；然而许多单克隆抗体产生于某个特定肽段而不是一个天然蛋白质，因此可能无法检测到PAGE所分离的天然蛋白。也可使用多克隆抗体，但易形成较高的背景值。因一抗通常无标记，所以需要一个可以结合在一抗Fc段的标记的二抗，以用于的检测。通常会用酶来标记二抗。酶标记后的印迹可通过化学发光酶底物及放射自显影技术成像。被抗体检测和标记到的蛋白质会出现在图像的暗区。

斑点印迹法

类似于免疫印迹法，在膜上检测目标蛋白；但是斑点印迹法中检测的蛋白质不用电泳进行分离。取而代之的是，含有目标蛋白的样品被直接“点”到膜上。这不是一种定量的方法，但它可以直接检测某种特定蛋白的有无; 例如，斑点印迹法可用于检测蔗糖梯度分离的细胞裂解产物中的某些蛋白质定位。

安装指南

CD34抗体（细胞表面的唾液粘蛋白）如何选择二抗

通常情况下，某一特定的实验中可能同时有几种二抗可供选择，如何能选择到Z适合该实验的二抗，需要综合以下几个方面进行考虑：

一抗的物种来源

一抗是在什么物种来源的，相应的二抗也要是抗该物种的抗体。例如，如果一抗是在小鼠体内制备的，那么你就应当选择抗小鼠的二抗，如果一抗是在兔体内制备的，那么二抗就应当是抗兔的抗体。至于二抗本身是在什么动物中制备的对二抗的质量并无明显的影响。

一抗是属于哪个类或亚类

二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.

单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗体。

如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么?憧梢匝≡窨笽gG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。

如果你不知道一抗是哪一类别或亚类，那么抗小鼠IgG是一个不错的选择，因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

注意事项

CD34抗体（细胞表面的唾液粘蛋白）订购注意事项

如何正确选择您所需要抗体

抗体的种类繁多，各种来源和标记令人眼花缭乱，供应商也参差不齐。如何选择合适的抗体确实是个令人头痛的问题，不妨从下面几个方面着手选择：

1 特异性：抗体能否特异性地结合特定的抗原，自然是选择正确抗体的关键。同时还需要关注抗体特异识别抗原的部位，交叉反应性和抗原抗体结合的亲和力。特异性与抗体制备时使用的抗原和抗体纯化工艺密切相关。

2 来源和标记：通常单克隆抗体来源于小鼠，多克隆抗体来源于兔和山羊；以生物素，各种酶和荧光素标记，可根据实验需要来选择。

3 应用：不同的抗体能应用于不同的实验，如ELISA，IHC，FC，WB和体内功能性实验等等，往往需要通过相应的实验来验证，实验时根据样本和目的不同来选择。

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 常用型号

典型的F（ab’）2片段的二抗

下面总结了几种具有不同特异性的二抗：针对整个抗体分子（H＋L）具有特异性：如抗IgG（H+L），此类抗体既可以与抗体的重链结合也可以与轻链结合，即与抗体分子的Fc，F（ab’）2/Fab部分（见图5）均可反应，抗IgG（H+L）也可以与其他免疫球蛋白家族反应（如IgM和IgA），因为所有的免疫球蛋白都具有相同的轻链（kappa链或lambda链）。

针对Fab片段具有特异性：这类抗体与重链轻链均可以结合，由于它们可以与轻链反应，它们同时也已和具有相同轻链的其他种类的免疫球蛋白反应。

这对Fc片段或重链具有特异性：这类抗体和重链的Fc部分反应，一次它们是类别特异性的（即gamma链特异性抗体只与IgG反应，mu链特异性抗体只识别IgM，依此类推）。

轻链（kappa，labmda）特异性：与所有类别的抗体反应，因为所有类别的抗体均具有相同的lambda链或kappa链。

经过吸附处理的二抗：不同来源的免疫球蛋白含有相似的结构，抗一个物种的抗体可能与其他物种发生交叉反应，一次有些二抗经过了动物或人类IgG吸附处理，以减少非特异性背景。例如，如果是小鼠的组织或细胞，那么选择经小鼠血清或IgG吸附处理过的二抗可以减少非特异性结合。但是此种抗体识别表位的数量被大大减少。

选择哪种形式的二抗，是整个IgG分子，F（ab’）2片段，还是Fab片段？

整个IgG分子：此种抗体适用于多数情况。

F（ab’）2片段：该种抗体是由两个靠二硫键连接的用于结合抗原的Fab片段组成，这些抗体用在特定的情况中，如需要避免抗体与具有Fc受体的细胞结合的情况。

Fab片段：它们只有一个结合位点，一般用来封闭内源性免疫球蛋白。

选用耦联有哪种探针的二抗？

一般来讲，耦联到二抗上的探针主要有酶（辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），荧光基团（FITC, RRX, TR, PE）和生物素。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于western blot和ELISA，Z常用的二抗是酶标二抗，而细胞或组织标记实验（细胞免疫化学，组织免疫化学，流式细胞术）中通常使用荧光基团标记的二抗，免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号，可以使用biotin/avidin检测系统。