大鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒规格:96T/48T 保持温度:2到8度运输条件:冰袋运输
ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法的基本类型、用途及操作程序 根据ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)所用的固相载体而区分为三大类型:一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒),即我们通常所指的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)(微量板ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒));另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒),称为斑点ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)(Dot-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒));再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒),称为布ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)(C-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒))。在微量板ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)中,又根据其性质不同分为间接ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、双抗体夹心ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、双夹心ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、竞争ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、阻断ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)及抗体捕捉ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)。
1.间接ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒) 本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)为例,间接ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)的操作程序如下。 (1) 材料 ① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液; ② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清; ③ ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。 (2) 方法步骤 ① 加抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干 ② 加待检血清 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干 ③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干 ④ 加底物液 → 37℃ 30分钟,加终止液 ⑤ 用ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)检测仪测定OD值,并计算出P/N比值。 (3) 结果判定 已知阳性血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且已知阳性血清的OD值≥0.4;在上述条件成立的情况下,如果待检血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且待检血清的OD值≥0.4,则判为阳性,否则判为阴性。 2.双抗体夹心ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒) 本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)为例介绍本法的操作程序。 ① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干 ② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干 ③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干 ④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液 ⑤ 用ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)检测仪测定OD值。