原代细胞培养概述
细胞培养是模拟机体内生理条件,将细胞从机体中取出,在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养。原代培养细胞离体时间短,性状与体内相似,适用于研究。
幼稚状态的组织和细胞,如:动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养。
原代细胞培养技术流程
1、取材:用颈椎脱位法使孕鼠迅速死亡。把整个孕鼠浸入盛有75%乙醇的烧杯中消毒3-5分钟,取出后放在大平皿中携入超净台。用消过毒的剪刀在躯干中部环行剪开皮肤,剖腹取出子宫置于无菌平皿中。用消过毒的剪刀剪开子宫,取出鼠胎,剪去头、爪,以平衡盐溶液洗去血污。
2、切割:用平衡盐溶液将取出的组织块清洗三次,然后用眼科手术剪刀仔细将组织反复剪碎,直到成1mm3左右的小块,再用平衡盐溶液清洗,洗到组织块发白为止。静置数分钟,使组织块自然沉淀到管底,弃去上清。
3、消化、接种培养:加入0.25%胰蛋白酶消化液(5-10倍量),与组织块混匀。置 37 ℃水浴,观察消化情况(每隔几分钟摇动一下试管),静止,吸去上清,加入5~10ml 细胞培养液,用吸管吹打混匀,移入二个培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养。
细胞接种后一般几小时内就能贴壁,并开始生长,如接种的细胞密度适宜,5天到一周即可形成单层。
客户须知
1、详细说明进行原代培养的组织,并说明组织是由顾客提供还是公司提供;
2、尽可能提供该原代细胞可能的培养条件;
3、对于一些常见的原代培养组织,因为保存运输的不便可能会降低原代培养的成功率,建议顾客选择提供相应的组织。
4、我司可以提供多种原代细胞培养的组织,详情请联系我们的客服人员
收费标准:
细胞培养一天100元,转染1次1种细胞一次质粒600元(细胞质粒自己提供),transwell 1000元一张,CCK-8每孔50,分PBMC 100
联系电话:13661449330,宋老师![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/3/pa?p=2:2293446234:41)
细胞培养技术服务博客:http://blog.sina.com.cn/u/3312807704