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（2）过碘酸盐氧化法：本法只适用于含糖量较高的酶。辣根过氧化物酶的标记常用此法。反应时，过碘酸钠将HRP分子表面的多糖氧化为醛基很活泼，可与蛋白质上的氨基形成Schiff氏碱而结合。酶标记物按克分子比例联结，其比例为：酶/抗体=1-2/1。此法简便有效，一般认为是HRPZ可取的标记方法，但也有人认为所有试剂较为强烈，各批实验结果不易重演。
按以上方法制备的酶结合物一般都混有未结合物的酶和抗体。理论上，结合物中混有的游离酶一般不影响ELISA中的酶活性测定，因经过彻底洗涤，游离酶可被除去，并不影响的显色。但游离的抗体则不同，它会与酶标抗体竞争相应的固相抗

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