A B双液 TMB显色液,TMB Liquid Substrate System 组成:TMB、H2O2、稳定剂。 贮存:密闭、避光、室温或低于室温保存。 稳定性:室温或低于室温保存,有效期大于3年。 使用方法: 根据需要等量混合,每孔100ul。注意混合马上使用,不要超过1小时,否则,敏感性降低。 温育:上述加液后,根据个人试验需要,可温育15-30分钟。 终止:加等体积的1N的HCl或者2N的H2SO4来终止反应。酶标孔中反应液从蓝色变为色。 读数:终止反应后,30分钟内在450nm处读数 注意: 降低底物强度:如果出现高的反应背景和/或沉淀, 表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可以在加入终止液后马上读数;另外,可以进一步稀释一抗和/或HRP结合物。为了降低非特异性背景颜色,推荐进一步降低一抗和/或HRP结合物的浓度,尽量避免降低底物浓度。 动力学检测:TMB单组分底物在与过氧化物酶反应时产生一种蓝色,可以在加底物后620-650nm处读数,不需终止反应。 |