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产品名称:“小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体试剂盒现货,FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA试剂盒促销”
产品编号:BYS12925B
英文名称:Mouse FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L Elisa KIT.
规格:48T/96T
价格:询价(电询或联系客服QQ)
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“小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体试剂盒现货,FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA试剂盒促销”操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。
(三) 试剂器材
1. 试剂
(1) 包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸馏水至1000ml
(2) 洗涤缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸馏水至1000ml
(3) 稀释液:牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗涤缓冲液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清与洗涤液配成5~10%使用。
(4) 终止液(2M H2SO4):蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸馏水50ml。
(6) TMB(四甲基联苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml底物缓冲液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg 底物缓冲液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl
(8) 抗原、抗体和酶标记抗体。
(9) 正常人血清和阳性对照血清。
2. 器材:
(1) 聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。
(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱
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Anti-NSE/FITC 荧光素标记神经元特异性烯醇化酶抗体IgG
Anti-Ntn1/FITC 荧光素标记轴突导向因子1抗体IgG
Anti-NT-3/FITC 荧光素标记神经营养因子-3抗体IgG
Anti-NT-4/NT-5 /FITC 荧光素标记神经生长因子4/5抗体IgG
Anti-NTCP/FITC 荧光素标记钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白IgG
Anti-NTN/FITC 荧光素标记神经生长因子抗体IgG
Anti-Nurr1/FITC 荧光素标记核受体相关因子-1抗体IgG
Anti-OAS1/FITC 荧光素标记寡腺苷酸合成酶-1抗体IgG
Anti-OAT-1/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-1(抗人)抗体IgG
Anti-OAT-1/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-1(抗大、小鼠)抗体IgG
Anti-OAT-3/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-3抗体IgG
Anti-OAT4L/URAT1 /FITC 荧光素标记尿酸盐重吸收转运子1抗体IgG
Anti-obestatin/Ghrelin/GHRP /FITC 荧光素标记肥胖YZ素抗体IgG
anti-OCLN(Occluding)/FITC 荧光素标记人咬合蛋白抗体IgG
Anti-ODC/FITC 荧光素标记抗鸟氨酸脱羧酶抗体IgG
Anti-OCT1 /FITC 荧光素标记阳离子转运器1抗体IgG
Anti-OCT2 /FITC 荧光素标记阳离子转运蛋白2抗体IgG
Anti-Oct-4/FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgG
Anti-Oct-4 /FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgG
Anti-Omgp /FITC 荧光素标记少突细胞髓磷脂糖蛋白抗体IgG
Anti-ompF/FITC 荧光素标记小肠结肠炎耶尔森氏菌膜通道蛋白抗体IgG
Anti-OPCML /FITC 荧光素标记样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体IgG
Anti-OPG /FITC 荧光素标记骨保护蛋白/护骨素抗体IgG
Anti-OPGL/RANKL/CD254 /FITC 荧光素标记骨保护蛋白配体抗体IgG
Anti-OPN/FITC 荧光素标记骨桥蛋白抗体IgG
Anti-OPN/FITC 荧光素标记骨桥蛋白抗体IgG
Anti-ORX-A/FITC 荧光素标记增食欲素-A/欲激素AIgG
Anti-Osx /FITC 荧光素标记成骨相关转录因子抗体IgG