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下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。
1.样品稀释 酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性。因此,国外检测血清抗体的试剂盒,均规定将血清稀释至适当的倍数,以降低非特异性反应,使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性。但是,有些用户未能严格按使用说明书操作,如某些产品应取10μl样品进行稀释,个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释,由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够,因此造成样品稀释倍数不准确,检测结果出现问题。
2.试剂盒平衡 试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分。冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟。
3.样品和试剂的混匀 稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性。
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大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
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小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B ELISA试剂盒北京,小鼠MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit Mouse matrix metalloproteinase 9//Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0049 小鼠基质金属蛋白酶YZ因子1 ELISA试剂盒北京,小鼠TIMP-1)ELISA Kit Mouse tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0050 小鼠碱性成纤维细胞生长因子 ELISA试剂盒北京,小鼠bFGF)ELISA Kit Mouse basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0051 小鼠巨噬细胞炎性蛋白5 ELISA试剂盒北京,小鼠MIP-5)ELISA Kit Mouse macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0052 小鼠可溶性E选择素 ELISA试剂盒北京,小鼠sE-selectin)ELISA Kit Mouse soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0053 小鼠可溶性细胞间粘附分子1 ELISA试剂盒北京,小鼠sICAM-1)ELISA Kit Mouse Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1,sICAM-1 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0054 小鼠可溶性血管细胞粘附分子1 ELISA试剂盒北京,小鼠sVCAM-1)ELISA Kit Mouse soluble vasccular cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0055 小鼠免疫球蛋白A ELISA试剂盒北京,小鼠IgA)ELISA Kit Mouse Immunoglobulin,IgA ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0056 小鼠免疫球蛋白E ELISA试剂盒北京,小鼠IgE)ELISA Kit Mouse Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0057 小鼠免疫球蛋白G ELISA试剂盒北京,小鼠IgG)ELISA Kit Mouse Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0058 小鼠免疫球蛋白M ELISA试剂盒北京,小鼠IgM)ELISA Kit Mouse Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0059 小鼠内皮抑素 ELISA试剂盒北京,小鼠ES)ELISA Kit Mouse Endostatin,ES ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0060 小鼠脑钠素/脑钠尿肽 ELISA试剂盒北京,小鼠BNP)ELISA Kit Mouse brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0061 小鼠皮质酮/肾上腺酮 ELISA试剂盒北京,小鼠CORT)ELISA Kit Mouse Corticosterone,CORT ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0062 小鼠前列腺素E2 ELISA试剂盒北京,小鼠PGE2)ELISA Kit Mouse Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0063 小鼠神经特异性烯醇化酶 ELISA试剂盒北京,小鼠NSE)ELISA Kit Mouse Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0064 小鼠细胞间粘附分子2 ELISA试剂盒北京,小鼠ICAM-2/CD102)ELISA Kit Mouse intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0065 小鼠细胞间粘附分子3 ELISA试剂盒北京,小鼠ICAM-3/CD50)ELISA Kit Mouse intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0066 小鼠纤溶酶原激活物YZ因子1 ELISA试剂盒北京,小鼠PAI-1)ELISA Kit Mouse plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
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DX0068 小鼠血纤蛋白原降解产物 ELISA试剂盒北京,小鼠FDP)ELISA Kit Mouse Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0069 小鼠血栓调节蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠TM)ELISA Kit Mouse thrombomodulin,TM ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0070 小鼠血小板衍生生长因子 ELISA试剂盒北京,小鼠PDGF)ELISA Kit Mouse platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0071 小鼠氧化低密度脂蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠OxLDL)ELISA Kit Mouse oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T