ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。
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大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
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下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。
1.样品稀释 酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性。因此,国外检测血清抗体的试剂盒,均规定将血清稀释至适当的倍数,以降低非特异性反应,使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性。但是,有些用户未能严格按使用说明书操作,如某些产品应取10μl样品进行稀释,个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释,由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够,因此造成样品稀释倍数不准确,检测结果出现问题。
2.试剂盒平衡 试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分。冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟。
3.样品和试剂的混匀 稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性。
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小鼠血小板衍生生长因子 ELISA试剂盒北京,小鼠PDGF)ELISA Kit Mouse platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0071 小鼠氧化低密度脂蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠OxLDL)ELISA Kit Mouse oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0072 小鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽 ELISA试剂盒北京,小鼠PⅢNT)ELISA Kit Mouse procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0073 小鼠Ⅲ型胶原 ELISA试剂盒北京,小鼠Col Ⅲ)ELISA KIT Mouse Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA KIT 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0074 小鼠C反应蛋白 ELISA试剂盒北京,小鼠CRP)ELISA Kit Mouse C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0075 小鼠组织因子 ELISA试剂盒北京,小鼠TF)ELISA Kit Mouse Tissue factor,IF ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0076 小鼠血小板因子4 ELISA试剂盒北京,小鼠PF-4/CXCL4)ELISA Kit Mouse Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0077 小鼠结缔组织生长因子 ELISA试剂盒北京,小鼠CTGF)ELISA Kit Mouse connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0078 小鼠白介素1可溶性受体Ⅰ ELISA试剂盒北京,小鼠IL-1sRⅠ)ELISA Kit Mouse soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0079 小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ ELISA试剂盒北京,小鼠IL-1sRⅡ)ELISA Kit Mouse soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0080 小鼠白介素2可溶性受体α链 ELISA试剂盒北京,小鼠IL-2sRα/CD25)ELISA Kit Mouse soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRα ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0081 小鼠白介素2可溶性受体β链 ELISA试剂盒北京,小鼠IL-2sRβ)ELISA Kit Mouse soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRβ ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0082 小鼠单核细胞趋化蛋白1 ELISA试剂盒北京,小鼠MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA Kit Mouse monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0083 小鼠单核细胞趋化蛋白2 ELISA试剂盒北京,小鼠MCP-2/CCL8)ELISA Kit Mouse monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0084 小鼠单核细胞趋化蛋白3 ELISA试剂盒北京,小鼠MCP-3/CCL7)ELISA Kit Mouse monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0085 小鼠基质金属蛋白酶1 ELISA试剂盒北京,小鼠MMP-1)ELISA Kit Mouse matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0086 小鼠基质金属蛋白酶10 ELISA试剂盒北京,小鼠MMP-10)ELISA Kit Mouse matrix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0087 小鼠基质金属蛋白酶13 ELISA试剂盒北京,小鼠MMP-13 ELISA Kit 代测 Mouse matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0088 小鼠基质金属蛋白酶7 ELISA试剂盒北京,小鼠MMP-7)ELISA Kit Mouse matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0089 小鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶 ELISA试剂盒北京,小鼠MMP-8)ELISA Kit Mouse matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0090 小鼠胎盘生长因子 ELISA试剂盒北京,小鼠PLGF)ELISA Kit Mouse placenta growth factor,PLGF ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0091 小鼠干细胞因子受体 ELISA试剂盒北京,小鼠SCFR)ELISA Kit Mouse Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0092 小鼠血管生成素受体Tie1 ELISA试剂盒北京,小鼠ANG-R-Tie1)ELISA Kit Mouse angiopoietin receptor Tie1,ANG-R-Tie1 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0093 小鼠血管生成素受体Tie2 ELISA试剂盒北京,小鼠ANG-R-Tie2)ELISA Kit Mouse angiopoietin receptor Tie2,ANG-R-Tie2 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
DX0094 小鼠基质金属蛋白酶YZ因子2 ELISA试剂盒北京,小鼠TIMP-2)ELISA Kit Mouse tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T
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DX0096 小鼠基质金属蛋白酶YZ因子4 ELISA试剂盒北京,小鼠TIMP-4)ELISA Kit Mouse tissue inhibitors of metalloproteinase 4,TIMP-4 ELISA kit 进口原装elisa说明书,elisa测定试剂盒代理免费代测,北京(加拿大HCB/美国R&D/美国RB/GBD)代理,elisa定量/定性/含量/活性检测试剂盒价格,elisa实验代测价格及检测方法elisa实验操作步骤注意事项说明书 48T\\96T