我公司elisa试剂盒高效,灵敏,特异,稳定的重复性和可靠性,适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本,购买本公司elisa试剂盒,可享受免费代测,技术指导,全方位售后服务,欢迎来电咨询。
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
Chinese Name/中文名 | 大鼠P53(P53)elisa试剂盒 |
English Name/英文名 | Rat p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit |
Organism/种属 | Rat /大鼠 |
Packing/规格 | 96T/Kit 48T/Kit |
Method/检测方法 | Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA |
Sample Type/样品类型 | Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品 |
检测原理:
采用双抗体夹心法测定 大鼠P53(P53) 水平。用纯化的 大鼠P53(P53) 抗体包被微孔板,制成固相载体,实验时依次在微孔板中加入样本及标准品,并加入HRP标记的抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,反复洗涤后加底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再用硫酸终止反应,转变成黄色。颜色的深浅和样品中的 大鼠P53(P53) 含量呈正相关。采用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值),根据标准曲线,计算测试样品中 大鼠P53(P53) 浓度。
大鼠P53(P53)elisa试剂盒实验材料与试剂配制:
1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 洗液的配制:按1:30的比例配制洗液备用。
大鼠P53(P53)elisa试剂盒样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3. 血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6. 组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3,因NaN3 YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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