硝基苯酸钠(物pNPP)磷酸酶检测试剂盒介绍蛋白磷酸酶来控制去除磷酸盐(PO4 3 - )组来自蛋白质分子,调节许多基本的细胞过程,如细 胞附着,增殖,分化和凋亡。ScienCellT物pNPP磷酸含量进行了优化以检测生物样品中的使用物pNPP大多数磷酸作为比色底物(4 -硝基苯基磷酸酯)的磷酸酶活性。一种水溶性的黄色产物在405nm处有强吸收物pNPP与磷酸酶反应过程中的开发,并用ELISA板读数器可以检测到。工具包组件猫。没有#样品瓶试剂数量存储8108a110×PNPP股票2.5毫升-20 0 C,暗81
品质管制
马铃薯磷酸酶,酸和碱性(六西格玛猫。P1146)从牛肠黏膜(六西格玛猫。P6772)连续稀释缓冲液酸性和碱性缓冲液。这两种磷酸酶的活性测定与ScienCellT磷酸酶物pNPP测定一个给定的反应时间(15分钟,45分钟)后,图1和图2中所示。
程序(96 - 孔板)
- 磷酸样品制备
- 准备串行磷酸样品稀释使用适当的缓冲液与兼容的pH值(即:缓冲液呈酸性,酸性磷酸酶,Z中性磷酸缓冲液中性,碱性磷酸缓冲液碱性)。
- 我们建议的浓度范围为0-100微克/毫升的磷酸稀释。磷酸酶具有非常高或低的活性,可能需要使用更低或更高的浓度,以确保在线性范围内的吸光度读数。
- 磷酸酶与已知的活动可以建立标准曲线。
- 分析过程
- 每个磷酸盐溶液45微升和5微升10×物pNPP股票吨到96 - 孔板的各孔中。拌匀,并在37℃孵育需要一段时间(10-60分钟)
- 停止缓冲器向每孔加入50微升使反应停止,拌匀,在ELISA板读数器与测试在405 nm的波长和参照波长在630 nm处测量吸光度,并从405中减去630nm的背景吸收纳米测量。