本试剂采用ELISA方法用于犬粪便中包虫抗原的检测。【试剂组成】1.预包被板48T/96T; 7. 样本稀释液(5号液)1支;2.酶结合物(1号液)1支; 8. 终止液(6号液)1支;3.浓缩洗涤液(2号液)1支; 9. 阳性对照品1支;4.底物(3号液)1支; 10.阴性对照品1支;5.显色剂(4号液)1支; 11.不干胶膜1/2片;6.2X浓缩粪便处理液(7号液,用前以蒸馏水等体积稀释)1支; 12.自封袋1个;13.使用说明书1份
包虫病犬粪抗原检测试剂盒
【原理】
本试剂采用ELISA方法用于犬粪便中包虫抗原的检测。
【试剂组成】
1.预包被板 | 48T/96T; | | 7. 样本稀释液(5号液) | 1支; |
2.酶结合物(1号液) | 1支; | | 8. 终止液(6号液) | 1支; |
3.浓缩洗涤液(2号液) | 1支; | | 9. 阳性对照品 | 1支; |
4.底物(3号液) | 1支; | | 10.阴性对照品 | 1支; |
5.显色剂(4号液) | 1支; | | 11.不干胶膜 | 1/2片; |
6.2X浓缩粪便处理液 (7号液,用前以蒸馏水等体积稀释) | 1支; | | 12.自封袋 | 1个; |
13.使用说明书 | 1份 |
【操作程序】
1. 样品处理 犬粪样品需要预先低温(-70℃以下)冷冻7天以上,以灭活虫卵。称取1克犬粪,加入1ml已稀释的粪便处理液,充分搅拌混匀,静置10分钟,再经5000rpm离心30分钟,取上清液检验。
2. 洗涤液配制 用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液(2号液)按1:10稀释,如取50ml浓缩液与450ml蒸馏水或去离子水充分混匀即为工作洗涤液。
3. 加样反应 每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔;其中阴、阳对照孔分别加入阴性、阳性对照各100ul,空白对照孔加入样品稀释液(5号液)2滴。其它各样本检测孔先滴加样品稀释液(5号液)各1滴,再取犬粪上清液50ul加入板孔中。37℃下避光反应30分钟,甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液洗涤4次,每次静止1分钟,拍干。
4. 加酶反应 除空白孔外,各孔加酶结合物2滴。37℃下避光反应30分钟,甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液洗涤3次,每次静止1分钟,拍干。
5. 显色反应 加底物液(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,终止反应(加终止液后,蓝色会变为黄色)并判读结果。
【结果判断】
阴性对照呈无色或浅黄色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。
以空白对照调零,用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度(A值)。待检孔A值大于阴性对照A值平均值的3.1倍者判为阳性。如阴性对照A值的平均值低于0.10时按0.10计算。