上海拜沃以质量为本,树立“拜沃质量”是公司的发展目标。我们一直加倍努力,竭尽全力做到不辜负您的支持与信赖。同时公司也离不开广大客户的帮助支持,真诚邀请国内外有实力的实验室、生物技术公司合作,共同发展。目前拜沃提供的服务范围包括:生物合成siRNA、shRNA的制备;转录编码shRNA的DNAs、转录编码shRNA的质粒载体订购;siRNA靶位的设计和实验选择分析;siRNA相关试剂和RNA技术相关产品的代理销售;重组病毒构建包装;基因蛋白表达、载体构建、多克隆抗体和单克隆抗体制备;多种细胞学服务;常用的分子生物学试剂、实验仪器、实验耗材销售等。 拜沃在分子生物学和免疫学实验技术,特别抗体制备技术方面同样具有丰富经验,提供快速、优质、性价比高的实验服务。
酵母双杂交cDNA文库构建
特点
→ 技术平台:Cloneminer II cDNA library construction kit (cat. No A11180)
→ 采用Invitrogen专利的Gateway位点特异性重组技术(Cloneminer II cDNA library construction kit)构建,使可能有相互作用的蛋白的下游表达和分析比以前更加方便
→ 通过使用三种报告基因和低拷贝数的载体,ProQuest™系统可以得出假阳性的可信结果。
→ 使用基于GAL4转录因子重建系统确定相互作用
原理
酵母双杂交技术产生以来,它主要应用在以下几方面:
(1) 检验一对功能已知蛋白间的相互作用。
(2) 研究一对蛋白间发生相互作用所必需的结构域。
(3) 用已知功能的蛋白基因筛选双杂交cDNA文库,以研究蛋白质之间相互作用的传递途径。
(4) 分析新基因的生物学功能,即以功能未知的新基因去筛选文库。ProQuest™系统依靠报告基因的转录激活来鉴定蛋白相互作用。将一个基因克隆到"诱饵"载体,pDEST™ 32,并和GAL4蛋白的DNA结合域(DBD)表达为融合蛋白。将第二个基因或者编码可能的相互作用子蛋白的cDNA文库克隆到"猎物"载体,pDEST™ 22,同GAL4的转录激活域(AD)表达为融合蛋白。当两个蛋白相互作用时,AD和DBD间距离被拉近,从而激活报告基因的表达。
服务流程
酵母双杂交cDNA文库构建
1) 提取总RNA,分离mRNA
2) 使用Cloneminer II cDNA library construction kit构建酵母双杂交文库
客户提供
1) 样品至少2g组织或1 x 10e7个或至少足够提取0.5mg总RNA的细胞
2)至少0.5mg的总RNA
我们提供
文库菌株(含20%甘油的SOC培养基)和文库构建报告(包括总克隆数CFU的鉴定图,文库单克隆菌落PCR鉴定图)
质量保证
→ 文库含有至少5 x10e6个原始克隆
→ 平均插入片断大小>1.2 kb
→ 有超过90%的克隆含有插入片段
详情请登入:www.biovol.net