非整合型慢病毒是根据普通的慢病毒(Lent virus)载体改造而来,该载体可以将外源基因有效地转导到目的细胞上,可以在细胞质内达到瞬时表达的效果。非整合型慢病毒包装系统是百恩维掌握的核心技术,在国内外领先。百恩维技术团队已进行过多种目的基因的非整合型慢病毒包装,具有丰富的科研经验。现有客户包括研究所、医院、生物公司等。
非整合型慢病毒包装系统是百恩维掌握的核心技术,在国内外领先。百恩维技术团队已进行过多种目的基因的非整合型慢病毒包装,具有丰富的科研经验。现有客户包括研究所、医院、生物公司等。
非整合型慢病毒的背景
非整合型慢病毒是根据普通的慢病毒(Lent virus)载体改造而来,该载体可以将外源基因有效地转导到目的细胞上,可以在细胞质内达到瞬时表达的效果。可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,同时避免基因整合到宿主染色体造成的危害。具有低免疫性、低危害的特点。可以装载比AAV更大的DNA片段,插入片段可达8kb以上。可以轻易感染人、鼠、猴等绝大多数哺乳类细胞,是一个很好的替代传统DNA瞬时转染的基因导入方法,免除了常规DNA瞬时转染的条件摸索过程(包括转染试剂的选择及剂量比的摸索)。
非整合型慢病毒包装技术服务包含内容:
(一) 非整合型慢病毒载体的构建:
将目的基因克隆构建到非整合型慢病毒载体,根据不同的研究需求,有用于基因过表达的非整合型慢病毒载体、用于RNAi的非整合型慢病毒载体、用于动物注射的非整合型慢病毒等;
(二)非整合型慢病毒包装:
1、得到的非整合型慢病毒载体,与辅助载体一起转染293T细胞进行包装;
2、将包装好的病毒超速离心收集;
3、将浓缩病毒进行滴定,滴定结果单位为TU/ml。
(三)非整合型慢病毒鉴定与质量控制:
1、测序鉴定
2、根据特定引物作RT-PCR鉴定
3、蛋白表达鉴定(根据客户要求)
非整合型慢病毒载体应用
1、动物体内注射
2、用于转染其他病毒难于转染的细胞,比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞
百恩维生物