孔雀石绿检测试剂盒说明书
使用之前要读说明书(中文说名书仅供参考请以英文为准)
适用
本试剂盒适用于水产品中孔雀绿的定量检测。
原理
本试剂盒原理是竞争酶联免疫检测方法,利用萃取剂从样品中提取到孔雀石绿. 在固相载体微孔板中加入标准和处理的样品,然后加入孔雀石绿抗体,反应30分洗孔,然后加入HRP标记的孔雀石绿孵育30分后洗板,洗涤后加入显色剂,结合的酶将无色的显色剂转化为蓝色的产物;加入反应终止液后使颜色由蓝色变为黄色;在450nm波长进行检测,样品中的孔雀石绿浓度与吸收光强度成反比 。
特异性
与孔雀石绿类似物的交叉反应
Compound %
CR
Malachite green 孔雀石绿
Leucomalachite 隐色孔雀绿
1%
Crystal Violet 结晶紫
120%
Leucocrystal Violet 隐色结晶紫
2%
检测限
水产品: 0.5 ppb
试剂盒组成
96孔酶标板:1块(8×12条)。 标准品贮备液(Standard): 1瓶(0.4ml/瓶),100ppb。
酶标记物:1瓶(25倍, 0.8ml)HRP标记的孔雀石绿结合物
孔雀石绿抗体:1瓶(9ml)
底物显色液:1瓶(16ml)
终止液:1瓶(12ml 、1N HCl)。
结合物稀释液:1瓶(15ml)。
样本稀释缓冲液:2瓶(25ml)
浓缩洗涤液:1瓶(5倍, 100ml/瓶)、酶标板的洗涤。
使用说明书
注意
不要使用过了有效日期的孔雀石绿检测试剂盒,不同批次、不同试剂盒之间的试剂等内容不可混用。不使用被污染和稀释的试剂。使用前将所有的试剂拿到室温(20℃-28℃),但不要超出24小时。孔雀石绿是抗生素应小心对待。终止液为1M的盐酸避免接触皮肤,如果不小心滴到皮肤上要马上用水清洗。洗液是5乘的在使用时要稀释。
还需设备
去离子水或重蒸水
100ml或更大的量筒
地址:深圳市宝安区福永街道怀德咸田三区富德商务大厦 1030 室 邮编:518103
电话:、33939611、33939612、33939613、33939698 传真:
2
样品提取和采集用的玻璃器皿
甲醇
25、50、100 和250μL 单道或多道移液器
计时器
旋涡混合器
洗瓶
吸水纸
离心机
450nm 滤光片的酶标仪
前处理方法:
鱼虾样品(1:5 稀释)
1、
在一个20ml的离心管中称取1克鱼虾样品。
2、
加入10ml乙酸乙酯/乙酸提取液(1ml冰乙酸 +99ml乙酸乙酯)
3、
使用涡旋震荡器充分震荡,Z好组织都溶解成细小粉末,每个样品要震荡2分钟。
4、
把离心管放在震荡器上震荡30分钟。
5、
4C 2,000g 或3500rpm离心10min。
6、
取1ml上清到新的管中,60C 氮气吹干。
7、
用50ul乙腈溶解干燥物,可以适当震荡,允许孵育30分以便更好的溶解,然后加入450ul