大鼠脑啡肽酶(NEP) ELISA试剂盒详细介绍:
[规格]:48T/96T
品Pai:瑞番
[检测波长]:450nm
[保存条件]:2-8°,六个月
[产品用途]:仅供科研使用
[检测目的]:用于测定血清,血浆,胸腹水等相关液体标本
[特点]:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
瑞番供应的种属有:人,鸡,鸭,鱼,马,兔 猪,植物等ELISA试剂盒等等
[标本处理]:
1. 本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
2. 实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
3. 若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
4. 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
5. 若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
6. 某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
7. 建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
[操作步骤]:
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
6、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
7、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
[大鼠脑啡肽酶(NEP) ELISA试剂盒问题解答]:
若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:
问题如下 | 可能原因 | 解决方案 |
1:标准曲线差? | 1吸取及洗涤不充分 2移液不JZ | 1充分的吸取及洗涤 2检查和校正移液器 |
2:精密度低? | 1洗涤不充分 2混匀不充分和吸取试剂不足 3重复利用吸头、容器和覆膜 加样不精确 | 1充分混匀和吸取试剂 2使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜 3检查和校正移液器 |
3:OD值低? | 1温育时间不正确 2温育温度不正确 3酶标记物或底物失效 4没有加入终止液 5超出读数时间读数 | 1保证充足的温育时间 2试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度 3通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查 4按照说明书实验操作步骤加入终止液 5在说明书推荐的读数时间内读数 |
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