检测细菌 假结核耶尔森氏菌鼠抗诊断血清（日本生研）

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日本生研 假结核耶尔森氏菌鼠抗诊断血清（日本生研）

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广州健仑生物有代理日本生研、丹麦SSI、德国Sifin、泰国血清：

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、流感、A链球菌、合胞病毒、腮病毒、乙脑、乙肝、寨卡、黄热病、黑热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

日本生研 假结核耶尔森氏菌鼠抗诊断血清（日本生研）

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一、材料准备
1) 250 ml TB溶液
10mM Pipes or 10 mM Hepes，0.65g
15 mM CaCl2，0.55g
250 mM KCl，4.66g
55 mM MnCl2，2.47g
除MnCl2外，将其它成份溶解于ddH2O后，用0.1M HCl调节pH值至6.7（如果HCl加过量了，必须废弃溶液后重新配制，不能用碱再调低pH值后使用），然后将2.475g MnCl2加入溶液，溶解后定容，用0.45 um孔径的滤膜过滤CJ，分装为每瓶50 ml，4°C贮存备用。
2) 其它溶液
250 mM KCl溶液100 ml：将1.86 g  KCl溶解到100 ml ddH2O。
1M MgCl2 +1 M MgSO4溶液10 ml：先配制1M MgCl2溶液，然后加入MgSO4，溶解后高压灭菌。
50 ml of 1 M glucose with ddH2O, filter, aliquot in 1.5 ml, store at -20°C
100 ml SOB培养基：
蛋白胨（Bacto tryptone）：2 g
酵母提取物（Bacto yeast extract）：0.5 g
NaCl：0.05 g
上述成份溶解于ddH2O后，加入10 ml 250 mM的KCl溶液，用5N NaOH调节pH值至7.0 (~0.2 ml)，用ddH2O定容至100 ml，高压灭菌后待用。
使用前，在100 ml SOB培养基中加入1 ml 2M Mg2+ (终浓度为20mM)。
SOC培养基：
在SOB培养基中加入葡萄糖至终浓度为20 mM即为SOC培养基
3) 高压灭菌的500 ml锥形瓶。
二、超级感受态制备方法：
1、将冻存的DH5α接种到2 ml SOB培养基，37°C振荡培养。
2、取1 ml培养液接种到100 ml SOB，37°C培养2~2.5 h，细菌浓度约为4 ~7×107CFU/ml或OD600值为0.5。每20~30 min测定1次OD600值。
3、将培养液分装到2个离心管，每管50 ml，冰浴10-15 min.
4、 750-1000 g (2000-3000 rpm)，4°C离心12 min，完全去除液体，收集菌体。