凝集法 荚膜型肺炎链球菌诊断血清39支套装

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日本生研 荚膜型肺炎链球菌诊断血清39支套装

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1、溶解包涵体的能力不同。尿素和盐酸胍属中强度变性剂，它们对包涵体氢键有较强的可逆性变性作用，但尿素溶解包涵体的能力较盐酸胍慢而弱。所需浓度尿素常为8M，8M尿素对大约三分之一种类的蛋白包涵体溶解效果较差，溶解能力为70-90%；盐酸胍常为6M，6M盐酸胍+DTT能溶绝大多数包涵体，溶解能力达95%以上。在室温下4～6mol/L尿素或3～4mol/L盐酸胍，可使球状蛋白质从天然状态转变为变性状态的中点。增加变性剂浓度可提高变性程度，通常8mol/L尿素或约6mol/L盐酸胍可以使蛋白质完全转变为变性状态。盐酸胍由于具有离子特性，因而比尿素的变性能力强。有一些蛋白质，在8mol/L尿素溶液中也不能完全变性，但是在8mol/L盐酸胍溶液中，它们一般以无规卷曲（完全变性）构象状态存在。
2、尿素可能会对蛋白质的氨基进行共价修饰，使一些氨基酸残基酰基化。8M尿素溶解的包涵体溶液在低温，如4℃可以较长期放置，甚至放置半个月也不会有太大影响。但在室温放置超过24小时，就可能会对目的蛋白有影响，因为尿素在作用时间较长或温度较高时会裂解形成氰酸盐，对重组蛋白质的氨基进行共价修饰，使一些氨基酸残基酰基化，从而可能会影响到复性蛋白质的生物学活性。