Universil--HILIC色谱柱
色谱柱信息
Universil--HILIC采用独特的键合固定相设计,以高纯度具有良好稳定性的硅胶为基质,Z大限度实现单层官能团的覆盖。通过严格控制单分子层形成以及封尾的化学反应条件,可确保柱 与柱 之间 有 着 可 靠的 重 现 性 。Universil—HILIC填料丙基酰胺键合硅胶,使对大多数非极性有机化合物的保留非常小,因此具有优异的分离效果。该填料为均一的球形颗粒。通过运用独有的匀浆装填技术装填得到的 Universil--柱柱床密度均一稳定,因此可保证具有Z高的柱效。HILIC
相关参数:
键合相 丙基酰胺键合硅胶
孔径 120Å
比表面积 300m2/g
PH范围:2-9
稳定性和性能
Universil-- HILIC柱无任何有几层,因此具有优异的化学稳定性。
Universil-- HILIC填料表面已被活化,可为化合物提供亲水作用的极性基团和静电互相作用的带电基团,因此具有高选择性和高分离度。
色谱柱安装与操作
色谱柱在运输过程中或在没有使用时,它的两端总是用堵头进行密封。当将色谱柱接入色谱仪器系统时,首先移去两端的堵头。请注意将流动相流动的方向与柱上标记的方向保持一致。除非出于特殊考虑,例如为了清除堵在色谱柱入口端的脏污等而需要将色谱柱反接以进行冲洗时,建议用户在接上色谱柱时一定要遵循柱上标记的方向。由于色谱柱的连接是整个色谱操作过程的一部分,如果密封卡套过紧,或安装不合适,或者密封卡套与色谱柱端口不匹配,都有可能导致溶液的泄漏。请按照下面步骤将色谱柱与密封卡套及管线相连接,从而将色谱柱接入 HPLC 系统:(a)一次使用的管线,请依次将管线接头和密封卡套装在外径 1/16”的管线上。密封卡套的宽口端应朝向管线接头。(b)将管线紧紧插入色谱柱的接口,向前滑动密封卡套和管线接头,并使管线接头的螺纹与色谱柱端口的螺纹相互衔接,然后拧紧管线接头。如果管线为高分子材料,请转到步骤(d);如果是金属管线,请继续(c)。(c)在用力将管线压入柱端接口之后,用 1/4”扳手将已拧紧的螺帽再进一步紧固。(d)对色谱柱的另一端采用上述方法进行操作。新的 Universil--柱中的液相是正己烷与异丙醇的混合溶液。HILIC
在储存和运输过程中,硅胶填料可能会干涸。这时推荐用 10-20 倍柱体积的纯有机溶剂如甲醇、乙腈等进行冲洗以活化色谱柱。接着可用 用 户 自 己选 择 的 流 动相 冲 洗 色 谱柱 。 流 速 由0.1mL/min 逐渐升至所需的操作条件,直至基线稳定为止。如果柱压和基线波动较大,这可能是气泡进入了色谱柱中。这时可用较高流速冲洗色谱柱2-5分钟,例如:4.6×150mm的色谱柱可采用流速2mL/min。
样品与流动相
为了避免色谱柱的堵塞,所有样品和溶剂,包括缓冲溶液在内,都必须在使用前用0.45μm或0.2μm 的滤膜过滤。Universil-- HILIC键合固定相与许多溶剂相容,包括有机溶剂,水缓冲溶液,或者有机溶剂与水的混合液如甲醇(或乙腈)的水溶液等。流动相在使用前需要脱气。一个简单的脱气方法是将流 动 相 在 由 水 泵 形 成 的 真 空 下 超 声5min 。 当Universil-- HILIC 柱用于梯度洗脱时,起始流动相通常为 5%甲醇(或乙腈)。
色谱柱的保养
pH 避免在 pH 低于2 或高于9的条件下使Universil- HILIC柱。较高的 pH 会溶解硅胶,引起分离效率的降低和保留时间的改变。为了获得的分离效果和延长柱的使用寿命,请尽量使用 pH 在 2 -8.5 范围
压力 尽管 Universil--柱可在高至 5000psi 的压力下使用,但正常的操作压力应当低于 3000psi。长时间在高压下运行会损坏色谱柱和输液泵。由于压力来源于流速,因此Z大流速将受制于系统所能承受的压力。一般而言,柱压会随着色谱柱使用时间的增加而逐渐增加。压力突然增加预示色谱柱入口端的筛板发生了堵塞。在这种情况下,建议将色谱柱反接后用适宜的溶剂进行冲洗。 HILIC
储藏 长期不用时,请不要让水或缓冲液存留在色谱柱中。在替代缓冲液时,请用至少 20-30 倍柱体积的 50%甲醇(或乙腈)的水溶液冲洗色谱柱,再用20-30 倍柱体积的纯有机溶剂如乙腈等进行冲洗。每根色谱柱在运输过程中均会附有两个可拆卸的堵头。为了防止柱床干涸,请用堵头塞紧色谱柱的两端。