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霍乱弧菌诊断血清(玻片凝集法)
广州健仑生物科技有限公司
霍乱是由霍乱弧菌所引起的。霍乱弧菌为革兰染色阴性,对干燥、日光、热、酸及一般消毒剂均敏感。霍乱弧菌产生致病性的是内毒素及外毒素。正常胃酸可杀死弧菌,当胃酸暂时低下时或入侵病毒菌数量增多时,未被胃酸杀死的弧菌进入小肠,在碱性肠液内迅速繁殖,并产生大量强烈的外毒素。这种外毒素具有ADP-核糖转移酶活性,进入细胞催化胞内的NAD+的ADP核糖基共价结合亚基上后,会使这种亚基不能将自身结合的GTP水解为GDP,从而使这种亚基处于持续活化状态,不断激活腺苷酸环化酶,致使小肠上皮细胞中的cAMP水平ZG,导致细胞大量钠离子和水持续外流。这种外毒素对小肠黏膜的作用引起肠液的大量分泌,其分泌量很大,超过肠管再吸收的能力,在临床上出现剧烈泻吐,严重脱水,致使血浆容量明显减少,体内盐分缺乏,血液浓缩,出现周围循环衰竭。由于剧烈泻吐,电解质丢失、缺钾缺钠、肌肉痉挛、酸中毒等甚至发生休克及急性肾衰竭。
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③ 容器顶端盖紧,底部放搅拌棒,在4°C电磁搅拌下透析标记24h。取出透析袋中标记液,即刻用SephadexG50凝胶过滤,去除游离荧光素,分装,贮存于4°C中。
直接免疫荧光法是荧光抗体技术中Z简单、Z基本的一种染色法。当某种荧光抗体直接与相应的被检抗原相遇时,则发生特异性反应。直接染色法的优点是:特异性高、操作简便、比较快速。缺点是:一种标记抗体只能检查一种抗原。另外,该法的敏感性也较差。
直接免疫荧光法检测细菌的实验步骤和注意事项
直接免疫荧光技术已被广泛用于细菌学检验,标本材料可以是细菌培养物、感染组织、病畜分泌、排泄物等,相比于其它鉴定细菌的血清学方法,该方法快速、操作简单、敏感性高。已有文献报道,应用荧光抗体技术检测沙门氏菌、霍乱弧菌( O1群、O139群)、兔波氏杆菌、鳗弧菌等。
一、基本原理
将荧光素标记在相应抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低,而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。