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操作方法:
1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内封存于2-8℃。
2.预留空白孔(若使用双波长读板,空白孔可以不设)。
3.分别将标本或不同浓度人IL-2标准品(0pg/ml孔加标准品稀释液)加入相应孔中(100μl/孔),用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱孵育90分钟。
4.提前30分钟制备生物素化人IL-2抗体工作液。
5.洗板3次。
6.加入生物素化人IL-2抗体工作液(100μl/孔)。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱孵育60分钟。
7.提前30分钟制备酶结合物工作液。室温避光放置。
8.洗板3次。
9.除空白孔外,加入酶结合物工作液(100μl/孔)。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱,避光孵育30分钟。
10.洗板5次。
11.加入TMB显色工作液(包括空白孔)100μl/孔,37℃孵箱,避光孵育,当标准曲线高浓度的颜色较深,有明显的颜色梯度的时候,即可终止。试验显色反应请勿超过30分钟。
12.加入终止液(包括空白孔)100μl/孔,混匀后即刻测量OD(450nm)值(10分钟内)。
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