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广州健仑生物科技有限公司
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通常情况下,鉴定是否存在某种微生物,必须通过采样、培养、挑选可疑菌落,然后进行一系列鉴定,这种鉴定方法通常需要48小时或更长时间才能得出结论。
美国一家公司开发了一种“生物发光性报告噬菌体”(bioluminescent reporter phage),可以将这种噬菌接种到可疑样品,然后检测噬菌体在样品中的增殖情况。结果表明,这种检测方法的敏感性非常好,可以检测到很少量的炭疽芽孢杆菌,并很容易排除假阳性。该方法的另一个好处是可以检测样品是否存在着活的炭疽芽孢杆菌或炭疽芽孢。
噬菌体是特异性感染裂解细菌的一种特殊病毒,必须在宿主菌内才能繁殖。在自然界中,噬菌体是伴随着宿主菌的分布而分布,凡有细菌分布的地方,均可发现其特异的噬菌体存在。例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌,故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体;乳牛场有较多的乳酸杆菌,相应也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。
大肠杆菌特异性裂解噬菌体的分离纯化实验方法
下面以大肠杆菌为例,介绍从污水中分离大肠杆菌裂解性噬菌体的分离方法:
1、用瓶子采集10份不同环境中的污水样品。
2、将采集的10份污水样品分别取85ml,加入50ml三倍浓缩的液体LB培养基和15ml宿主菌的过夜培养菌液,置37℃振荡培养过夜。将过夜培养液以6000 rpm离心15min,弃沉淀,上清液用经0.2μm微孔滤膜过滤,滤液即为噬菌体原液。