高通量浆细胞(单个B细胞)抗体筛选系统 HT-NIC
目前单克隆抗体制备技术主要有:杂交瘤技术、EBV 转化B 淋巴细胞技术、噬菌体展示技术、转基因小鼠技术以及单个B 细胞抗体制备技术。
传统的鼠杂交瘤单克隆抗体技术得到的鼠源抗体免疫原性高、半衰期短,往往临床LX不显著,需要人源化改造或者使用人瘤细胞系来改进杂交瘤技术。
研究者利用EB 病毒 (Epstein-Barr Virus,EBV) 在体外能感染正常静止的B 细胞,使它们变成永生化的淋巴细胞系这一特性,制备分泌人单抗的杂交瘤细胞,即EBV 转化B 细胞技术。然而,EBV 转化B 细胞株不是恶性肿瘤细胞,较难克隆且抗体产量低,因而仍然没有得到广泛应用。
噬菌体展示技术是目前广泛应用的体外筛选人源抗原特异性抗体可变区基因的一种方法,噬菌体展示是将抗体DNA 序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使抗体随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。
除此之外,转基因鼠抗体制备技术在破坏鼠内源抗体基因后导入人抗体基因,进而用目标抗原免疫转基因鼠并在其体内表达人源抗体,这种方法得到的抗体产量和亲和力较高。
单个B 细胞抗体制备技术是一种体外克隆和表达单个抗原特异性B 细胞抗体基因技术,这种方法保留了轻重链可变区的天然配对,具有基因多样性好、效率高、全人源、需要的细胞量少等优势。
高通量浆细胞(单个B细胞)抗体筛选系统 HT-NIC是德国ALS公司新发布的产品,主要用于抗体的开发和细胞系筛选。它采用纳米孔板和CellCelector全自动细胞 仪,开发出一整套成熟的浆细胞抗体开发方案。
高通量浆细胞(单个B细胞)抗体筛选系统 HT-NIC
优点和主要特征:
高通量筛选:一个纳米孔板里面有40万的纳米小孔
单细胞:小孔直径30μm,刚好足够一个浆细胞
快速:抗原磁珠在一个小时内捕获抗体,得到结果
准确:通过荧光找到需要的浆细胞,图像可视化
高精度挑选:纳升级精确挑取,成功捕获
整个过程数字化存档,保证整个实验的可追溯性