牛冠状病毒(BCV)核酸检测试剂盒图片使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
牛冠状病毒(BCV)核酸检测试剂盒图片 | 48T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(Z多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
牛冠状病毒(BCV)核酸检测试剂盒图片15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
鬼臼毒素英文名称:PodophyllotoxinCAS号:518-28-5分子式:414.41188分子量:C22H22O8
4-溴-2-甲吡分子式:172.02分子量: C6H6BrN英文名称:4- -2- methyl pyridineCAS号:22282-99-1
丙二丁英文名称:Propylene glycol butyl etherCAS号:29387-86-8分子式:132.20074分子量: C7H16O2
氯代氢三(三膦)钌(II)甲加合物分子式:分子量:英文名称:Three (three phenyl phosphate) ruthenium (II) toluene adductCAS号:217661-36-4
溶剂蓝35英文名称:Solvent blue 35CAS号:17354-14-2分子式:350.45分子量: C22H26N2O2
钙黄绿素英文名称:CalceinCAS号:1461-15-0分子式:622.55分子量: C30H26N2O13
2-噻唑啉分子式:102.16分子量: C3H6N2S英文名称:2- aminothiazolineCAS号:1779-81-3
隐绿原英文名称:Chlorogenic acidCAS号:905-99-7分子式:354.31分子量:C16H18O9
5-溴-2-羟甲吡分子式:188.02分子量: C6H6BrNO英文名称:5- bromide -2-CAS号:88139-91-7
3--4-吡唑分子式:108.1分子量: C4H4N4英文名称:3- -4- cyano amino pyrazoleCAS号:16617-46-2
1,8-二氮-9-芴酮(DFO)英文名称:1,8- two n -9- fluorenone (DFO)CAS号:54078-29-4分子式:182.18分子量: C11H6N2O
牛冠状病毒(BCV)核酸检测试剂盒图片phospho-p107/RBL1(Ser975) 磷酸化视网膜母细胞瘤样蛋白p107抗体 0.1ml
EST1A 端粒酶结合蛋白EST1A抗体 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Cy3 Cy3标记的兔抗猪IgG 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗兔IgG 0.1ml
Phospho-TLK1(Ser695) 磷酸化调节染色体组装激酶1抗体 0.1ml
ERdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10蛋白抗体 0.2ml
ENC1/KLHL35 外胚层神经皮层蛋白1抗体 0.2ml
Caspase 2 半胱胺酸蛋白酶-2抗体 0.1ml
BMPER BMP内皮细胞调节蛋白抗体 0.2ml
THRA1 甲状腺激素受体α1抗体 0.2ml
RAP1GDS1 G蛋白GTP-GDP解离刺激因子1抗体 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的小鼠抗人IgG 0.1ml
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是Z末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。