猪圆环病毒通用型（PCV-U）核酸检测试剂盒

反应五要素:
猪圆环病毒通用型(PCV-U)核酸检测试剂盒方法参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是Z末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

使用及效果：
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（Z多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:

自备物品：
猪圆环病毒通用型(PCV-U)核酸检测试剂盒方法15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶标板：用于比色的容器
分光光度仪：用于比色分析
酶标仪：用于微量样品比色分析
储存条件：
14℃或－20℃
准备物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份

DAABD-Cl分子式：304.75分子量： C10H13ClN4O3S英文名称：daabd CLCAS号：664985-43-7

1-正丁-4[(4-甲氧)乙炔]分子式：264.36分子量： C19H20O英文名称：1- butyl -4[(4-) - phenyl groupCAS号：35684-12-9

1,4-双(4-氧)分子式：292.33分子量： C18H16N2O2英文名称：1,4- bis (4-) benzeneCAS号：581437

2-氟-5-(三氟甲)吡分子式：165.09分子量： C6H3F4N英文名称：2- -5- (three) pyridineCAS号：69045-82-5

2-氯-5-吡分子式：138.55分子量： C6H3ClN2英文名称：2- chloro -5- cyanopyridineCAS号：33252-28-7

东莨菪素英文名称：ScopoletinCAS号：92-61-5分子式：192.168分子量：C10H8O4

2--4-氯嘧分子式：129.55分子量： C4H4ClN3英文名称：2- amino -4-CAS号：3993-78-0

1-甲氧萘分子式：158.2分子量： C11H10O英文名称：1- methyl groupCAS号：2216-69-5

间-双溴甲分子式：421.75分子量： C6H4(CHBr2)2英文名称：Inter - bisCAS号：36323-28-1

2-三甲硅噻唑分子式：157.31分子量： C6H11NSSi英文名称：2- three trimethylsilyl thiazoleCAS号：79265-30-8

5--2,2-二氟-1,3-并二噁唑分子式：173.12分子量： C7H5F2NO2英文名称：5- -2,2- two -1,3- fluorine amino benzene and two oxazoleCAS号：1544-85-0

猪圆环病毒通用型(PCV-U)核酸检测试剂盒方法EGF  小鼠抗表皮生长因子抗体 0.1ml

Protein A  重组金黄色葡萄球菌蛋白A抗体 0.1ml

phospho-Dnmt1(Ser154)  磷酸化DNA甲基转移酶1抗体 0.1ml

IFN-Beta  干扰素β抗体 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/RBITC  罗丹明标记的驴抗人IgG 0.1ml

hnRNP R  异质性核糖核蛋白R 0.2ml

LCA5  致盲基因LCA5蛋白抗体 0.2ml

PRKCDBP  蛋白激酶C delta结合蛋白抗体 0.2ml

SMURF1  Smad蛋白E3泛素连接酶1抗体 0.2ml

phospho-FAK(Ser732)  磷酸化粘着斑激酶抗体 0.1ml

COX4NB  COX4NB蛋白抗体 0.2ml

Phospho-Histone H3 (Thr3)  磷酸化组蛋白H3抗体 0.1ml