2. 由于CCK-8 产生的甲臜是水溶性的,无需吸掉基后,再用DMSO 等溶解,非常适合用于悬Gluconate (sodium);D-葡萄糖酸钠 527-07-1浮细胞的活性测定。
3. 与MTT 相比,CCK-8 法线性范围更宽,灵敏度更高。
4. CCK-8 法对细胞性,可以多次测定,选取佳测定时间。
5. CCK-8 法无需配制,即开即用。
6. CCK-8 法适合大规模、高通量的样品检测。
Gluconate (sodium);D-葡萄糖酸钠 527-07-1使用
1. 在96 孔板中配制100 μL 的细胞悬液。将板在箱预24 小时(在37℃,5% CO2的条件下)。
2. 向板加入10 μL 的待测进行处理。
3. 根据实验需要,将板在箱孵育一段时间 (例如:6, 12,24 或48 小时)。
Gluconate (sodium);D-葡萄糖酸钠 527-07-1注:如果不进行处理而直接测定细胞的活性,则不需要2-3 步骤,直接从第4 步操作。
4. 向每孔加入10 μL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响O.D 值的读数)。
5. 将板在箱内孵育2-4 小时。
6. 用酶标仪测定在450 nm 处的吸光度。
7. 如果暂时不测定OD 值,可 以向每孔中加入10 μL 1% SDS(w/v) 溶液或者 0.1 M HCl 溶液,并盖上板盖子,在室温条件下避光保存。24 小时内吸光度不会发生变化。
Gluconate (sodium);D-葡萄糖酸钠 527-07-1注意事项
1. 由于96 孔板周围一圈容易蒸发,周围一圈建议不用,改加PBS或水。
2. CCK-8 检测细胞活性的原理是通过检测活细胞脱氢酶催化的反应。如果待测体系中存在还原剂(例如一些抗氧化剂),可能会检测结果,需设法去除其影响。
3. 当使用96 孔板时,贴壁细胞的小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μL 基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μL基),且加入CCK-8后孵育的时间长一些。
4. 如果细胞时间较长,基颜色发生变化,应洗涤细胞更换基后再加CCK-8 检测。
5. 酚红和对本试剂盒的测定无明显影响。基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除只含有基的对照孔中本底的吸光度而,因此不会对检测结果造成影响。
Gluconate (sodium);D-葡萄糖酸钠 527-07-1细胞活力/性检剂盒
细胞活力/性检剂盒
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