CNWSIL SCX强阳离子交换色谱柱CNWSIL SCX柱快速检测原料乳中的三聚氰胺

方法来源： GB/T 22400-2008 原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法 上海安谱科学仪器有限公司根据国标方法《GB/T 22400-2008 原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法》对乳中三聚氰胺的快速检测方法进行了实验，采用CNWSIL SCX强阳离子交换色谱柱对三聚氰胺进行检测，保留时间约为9.7分钟左右，能够很好的与乳中的杂质分离，柱效好，非常适用于原料乳中的三聚氰胺(melamine)快速检测。 谱图(见产品图片)色谱柱：CNWSIL SCX强阳离子交换色谱柱(250×4.6mm,5um) (货号：LAEQ-4525004605)流动相：磷酸盐缓冲溶液－乙腈(70＋30，体积比) 流速：1.5ml/min 波长：240nm 进样量：20ul 订购及索取详细资料请联系我们： 上海安谱科学仪器有限公司 Tel: Mail: 附： GB/T 22400—2008 原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法 Rapid determination of melamine in raw milk High performance liquid chromatography method 主要实验步骤和注意事项： 4 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682规定的一级水。 4.1 乙腈(CH3CN)：色谱纯。 4.2 磷酸(H3PO4)。 4.3 磷酸二氢钾(KH2PO4)。 4.4 三聚氰胺标准物质(C3H6N6)：纯度大于或等于99%。 4.5 三聚氰胺标准贮备溶液：1.00×103 mg/L。 称取100 mg 三聚氰胺标准物质(准确至0.1 mg)，用水完全溶解后，100 mL 容量瓶中定容至刻度， 混匀，4℃条件下避光保存，有效期为1 个月。 4.6 标准工作溶液：使用时配制。 4.6.1 标准溶液A：2.00 ×102 mg/L。 准确移取20.0 mL 三聚氰胺标准贮备溶液(4.5)，置于100 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。 4.6.2 标准溶液B：0.50 mg/L。 准确移取0.25 mL 标准溶液A(4.6.1)，置于100 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。 4.6.3 按表1 分别移取不同体积的标准溶液A(4.6.1)于容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。按表2 分别移取不同体积的标准溶液B(4.6.2)于容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。 4.7 磷酸盐缓冲液：0.05 mol/L。 称取6.8 g磷酸二氢钾(4.3)( 准确至0.01 g)，加水800 mL完全溶解后，用磷酸(4.2)调节pH至3.0， 用水稀释至1 L，用滤膜(4.9)过滤后备用。 4.8 一次性注射器：2 mL。 4.9 滤膜：水相，0.45 μm。 4.10 针式过滤器：有机相，0.45 μm。 4.11 具塞刻度试管：50 mL。 (表略。) 5 仪器 5.1 液相色谱仪：配有紫外检测器/二极管阵列检测器。 5.2 分析天平：感量0.0001 g 和0.01 g。 5.3 pH 计：测量精度±0.02。 5.4 溶剂过滤器 6 测定步骤 6.1 试样的制备 称取混合均匀的15 g原料乳样品(准确至0.01 g)，置于50 mL具塞刻度试管(4.11)中，加入30 mL 乙腈(4.1)，剧烈振荡6 min，加水定容至满刻度，充分混匀后静置3 min，用一次性注射器(4.8)吸 取上清液用针式过滤器(4.10)过滤后，作为GX液相色谱分析用试样。 6.2 GX液相色谱测定 6.2.1 色谱条件 a) 色谱柱：强阳离子交换色谱柱，SCX，250 mm × 4.6 mm(i.d.)，5 μm，或性能相当者。 注： 宜在色谱柱前加保护柱(或预柱)，以延长色谱柱使用寿命。 b) 流动相：磷酸盐缓冲溶液(4.7)- 乙腈(70+30，体积比)，混匀。 c) 流速：1.5 mL/min。 d) 柱温：室温。 e) 检测波长：240 nm。 f) 进样量：20 μL。 6.2.2 液相色谱分析测定 6.2.2.1 仪器的准备 开机，用流动相平衡色谱柱，待基线稳定后开始进样。 6.2.2.2 定性分析 标准溶液A体积(mL) 0.10 0.25 1.00 1.25 5.00 12.5 定容体积(mL) 100 100 100 50.0 50.0 50.0 标准工作溶液浓度(mg/L) 0.20 0.50 2.00 5.00 20.0 50.0 标准溶液B体积(mL) 1.00 2.00 4.00 20.0 40.0 定容体积(mL) 100 100 100 100 100 标准工作溶液浓度(mg/L) 0.005 0.01 0.02 0.10 0.20 依据保留时间一致性进行定性识别的方法。根据三聚氰胺标准物质的保留时间，确定样品中三聚氰 胺的色谱峰(参见附录A)。必要时应采用其他方法进一步定性确证。 6.2.2.3 定量分析 校准方法为外标法。 6.2.2.3.1 校准曲线制作 根据检测需要，使用标准工作溶液(4.6.3)分别进样，以标准工作溶液浓度为横坐标，以峰面积为 纵坐标，绘制校准曲线。 6.2.2.3.2 试样测定 使用试样(6.1)分别进样，获得目标峰面积。根据校准曲线计算被测试样中三聚氰胺的含量(mg/kg)。 试样中待测三聚氰胺的响应值均应在方法线性范围内。 注： 当试样中三聚氰胺的响应值超出方法的线性范围的上限时，可减少称样量再进行提取与测定。 10 注意事项 a) 如果保留时间或柱压发生明显的变化，应检测离子交换色谱柱的柱效以保证检测结果的可靠性； b) 使用不同的离子交换色谱柱，其保留时间有较大的差异，应对色谱条件进行优化； c) 强阳离子交换色谱的流动相为酸性体系，每天结束实验时应以中性流动相冲洗仪器系统进行维护保养。