STR分析有更优越表现。
将AmpFlSTR对照DNA(1 ng)稀释在200 μl Buffer G2中,在EZ1 Advanced工作站上使用EZ1 DNA Investigator Kit按照痕量实验方案进行纯化。DNA洗脱在50 μl水中,取10 μl(对应200 pg DNA)用于STR分析。 PCR产物在ABI PRISM 310 Genetic Analyzer上使用Genotyper分析软件进行分析。(数据由德国慕尼黑Ludwig Maximilian大学,Institute of Legal Medicine,B. Bayer和K. Anslinger提供。)
Performance
更高的纯化效率,用于敏感的下游分析
EZ1 DNA Investigator Kit含有优化的试剂,可自动纯化获得高产量DNA。在STR分析中获得更高的峰值,提高检测灵敏度(参见"Improved performance in STR analysis")。具有更高的信噪比,确保下游应用中的高灵敏性和优越表现。比较STR分析中的峰高,潜在的DNA的回收率为79%(未显示)。使用TE缓冲液洗脱,结果相似,而且长时间贮存时有更高的稳定性。任何样本的处理过程无遗失(检查任意8个等位基因都有<50的相对荧光单位)。
不同实验方案STR的相对峰高值实验 | 试剂盒和卡 | 方案 | 洗脱液 | 相对峰高值 | 遗漏数 |
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1 | EZ1 DNA Tissue Kit和EZ1 DNA Forensic Card | 痕量 | 水 | | 0/8 |
1 | EZ1 DNA Investigator Kit和Card | 痕量 | 水 | 176% | 0/8 |
2 | EZ1 DNA Investigator Kit和Card | 痕量 | 水 | | 0/8 |
2 | EZ1 DNA Investigator Kit和Card | 痕量 | TE | 116% | 0/8 |
3 | EZ1 DNA Investigator Kit和Card(200 µl) | 痕量 | 水 | | 0/8 |
3 | EZ1 DNA Investigator Kit和Card(500 µl) | 大体积 | 水 | 203%(起始样本量的81% ) | 0/8 |
AmpFlSTR处理的DNA由Buffer G2溶解,浓度为5 pg/µl,200 µl(或500 µl的大体积样本)使用特定的试剂盒和方案处理,洗脱体积为50 µl。每个实验中8个峰的峰高都已标准化。(数据由B. Bayer and K. Anslinger,Institute of Legal Medicine,Ludwig Maximilian University, Munich,Germany提供)
tip dance方式处理固体样本,操作简单
除了标准的微量方案,还可选用全自动tip dance实验方案,移液过程中滤嘴相对工作平台可来回移动。这样可在同一管中直接处理固体样本,如:拭子、组织、血斑或烟头。无需事先离心去除会阻塞滤嘴的固态物质(参见。tip dance实验方案简化了操作步骤,在某些情况下能更有效的提取样本提高DNA的产量(参见"Easy and efficient processing of solid materials with the "tip dance" protocol")。
经优化的实验方案,更大的样本容量
大体积实验方案可全自动处理的起始样本量多达500 µl。这不仅可以从含有低浓度DNA的稀释样本,如扩散的污渍中GX纯化DNA,而且能够纯化需要用大体积进行彻底裂解的样本。可处理大容量样本(与标准的微量方案有相同的洗脱体积),就可获得更高产量、更高浓度的DNA,在下游应用中有更高的灵敏度(参见"Higher yields of concentrated DNA with the large-volume protocol")。
有效纯化少量DNA
EZ1 DNA Investigator Kit使用载体RNA,用于提GX率。载体RNA可促进DNA结合到磁珠表面的硅胶上,尤其是含有少量DNA(<100 ng)的样本。公布数据表明载体RNA能够更有效的纯化法医检材样本中的少量DNA,而且对于相同的样本类型可提高DNA产量。载体RNA用于样本裂解也不会影响下游STR分析。
简单的实验设置和操作
使用预设的EZ1 Advanced XL DNA Investigator Card(用于EZ1 Advanced XL)、EZ1 Advanced DNA Investigator Card(用于EZ1 Advanced)和EZ1 DNA Investigator Card(用于BioRobot EZ1)设定纯化方案,十分便利。EZ1 DNA Investigator Kit采用预封装试剂条,减少人工操作的错误和避免缓冲液的污染。通过消除试剂准备和工作站设置时人工操作的失误,以及一个无交叉污染的液体处理,EZ1 Advanced XL、EZ1 Advanced和BioRobot EZ1可确保高度可靠性和标准化。
保证质量