快速、便1 mg转染级质粒DNA试剂盒

色谱分析。

利用HPLC在阴离子交换纯化柱上对使用QIAGEN Plasmid Plus Mega Kit纯化的质粒DNA (100 μg) 进行分析，检测非质粒核酸污染 (即RNA或基因组DNA)。在质粒制备中不存在污染。

Performance

稳定的质量和性能

QIAGEN Plasmid Plus技术可达到与阴离子交换技术相同的性能和品质。QIAGEN Plasmid Plus纯化柱独特的结合试剂确保得到高纯度质粒DNA。QIAGEN Plasmid Plus Maxi Kit提供高产量的实验方案和额外缓冲液，可获得多达10 mg高纯度质粒DNA，无RNA、蛋白质和基因组DNA等污染物（参见"High yields are ensured with QIAGEN Plasmid Plus Kits (QPP)"和"Analytical chromatogram"）。

转染级质粒DNA，内毒素水平低

内毒素，又名脂多糖或LPS，在纯化质粒过程的裂解步骤释放，是革兰氏阴性菌如E. coli细胞膜的组成部分。内毒素包括非特异性激活免疫反应，是转染实验的非可控变量，影响实验结果和重复性，使其难以比较和解释。

该试剂提供的洗涤液将内毒素水平降至1 EU/μg DNA以下。（依宿主菌、培养基和细胞密度的不同而不同。如果细胞密度很高，内毒素水平也略高，在1–3 EU/μg DNA范围内。） 这使得到的质粒DNA适合多种应用，包括在敏感细胞系中转染（参见"Endotoxin levels using QIAGEN Plasmid Plus Kits"、"Endotoxin levels using different isolation methods"和"Efficient transfection in sensitive cell lines"）。 

Principle

QIAGEN Plasmid Plus Kit进行大规模质粒纯化，方便快捷。独特设计的QIAGEN Plasmid Plus纯化柱和创新的结合试剂，使其只需简单的结合–洗涤–洗脱过程。QIAGEN Plasmid Plus Kit可在20分钟内实现快速大规模的质粒制备。无需乙醇沉淀可直接用于下游各种应用。该质粒DNA适用于要求小体积量的应用。

使用LyseBlue试剂，产量化

该试剂盒也包含LyseBlue指示剂，用于指示缓冲液混合状态。通过简单的颜色变化，就可避免常见的手动操作失误，防止细胞裂解不充分及SDS、基因组DNA和细胞碎片沉淀不完全。这种独特的缓冲液添加剂确保了细胞充分裂解和完全中和，使产量化。

Procedure

QIAGEN Plasmid Plus Kits提供的QIAfilter试剂条能快速澄清裂解液。一步即可将裂解液装入柱中，节约时间。使用真空装置（如QIAvac 24 Plus）抽吸澄清的裂解液及后续的洗涤缓冲液，使其流过QIAGEN Plasmid Plus离心柱。将膜洗涤和干燥后，即可通过离心获得高浓度DNA（参见"QIAGEN Plasmid Plus procedure"）。

Applications

QIAGEN Plasmid Plus Kit纯化得到的转染级质粒DNA适合多种应用，例如：

转染多数细胞系（敏感细胞系如Huh-7）

限制性酶切

克隆

体外转录和翻译

测序