质粒纯度与转染效率。
图中显示了在无血清条件下,在悬浮液中生长的CHO SSF3 X9细胞中,质粒DNA的数量和质量对转染效率的影响。每个点代表三次独立实验的平均值;Rel. LU:相对光单位。(数据由瑞士巴塞尔诺华公司的M. Zang-Gandor,提供。)
Performance
EndoFree Plasmid Kit将GX的内毒素去除步骤整合到质粒纯化流程中,不需要额外步骤,也不需用亲和柱去除脂多糖。通过QIAfilter Mega-Giga Cartridge过滤细菌裂解液,并使用重力流QIAGEN-tip阴离子交换柱纯化质粒DNA。产量可达10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 μg(Maxi)DNA。纯化的DNA无内毒素(<0.1 EU/µg DNA)。
选用EndoFree Plasmid Mega Kit而非EndoFree Plasmid Giga Kit纯化低拷贝质粒和科斯质粒,将会得到更好的效果,因为后者需要较大的培养体积,而QIAfilter Mega-Giga Cartridge的容量有限。
EndoFree Plasmid Kits去除细菌在裂解过程中释放的内毒素,内毒素会影响原代细胞和敏感培养细胞的DNA转染。从EndoFree Plasmid Kits得到的无内毒素DNA高度适用于可重复且结果可靠的转染(参见"Plasmid purification method versus transfection efficiency"和"Plasmid purity versus transfection efficiency"及表"Endotoxin levels in plasmid preparations"和"EndoFree DNA yields high transfection efficiencies with primary cells")。QIAGEN超纯无内毒素DNA也适用于基因ZL研究和其他敏感应用。