gibco胎牛血清10270-106南美原装进口血清
GIBCO胎牛血清10270-106FetalBovineSerum,qualified,E.U.-approved
产品名称:胎牛血清
品Pai:GIBCO
货号:10270-106
来源:SouthAmericaorigin
规格:500ML
Endotoxin:0.754EU/ML
Hemoglobin:11.22/(mg/ml)
PH:6.98
储存温度:-20°C
应用:较贵细胞,原代细胞,肿瘤细胞均可
GIBCO胎牛血清10270-106FetalBovineSerum,qualified,E.U.-approved
牛血清的主要成分
牛血清是一种成分复杂的混合物,其大部分成分已为人所知,但还有一部分仍不清楚,而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。
牛血清主要成分有以下几类:
1、蛋白质类包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(YZ胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)、纤维粘连素(促进细胞附着生长)等;
2、多肽类主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,Z主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用;
3、激素类激素对细胞的作用是多方面的。包括:胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关;类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用:促生长激素:促进细胞增殖的效应;氢hua可的松:血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。但有人证明,血清中的氢hua可的松,在细胞密度较高时可能有YZ细胞生长和诱导细胞发生分化的作用。
4、其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培养基中这些成分的作用并不明显,与蛋白相结合的微量元素对细胞生长起促进作用。
牛血清在细胞培养基中的主要功能
牛血清是细胞培养中用量的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。
1、提供能促使细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或含量微小的营养物,以及某些低分子营养物质;
2、提供结合蛋白,识别维生素、脂类、金属离子,并与有毒金属和热源物质结合,起作用;
3、是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源;
4、起酸碱度缓冲液作用;
5、提供蛋白酶YZ剂,细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受损伤。
血清储存和解冻
将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内(由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形),再放回冷冻。
避免血清产生沉淀
按如下操作可避免沉淀的产生:
(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
(2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
(4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
(6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
若溶解后血清有少许沉淀,不要紧张,不会影响血清质量,也不会影响细胞的培养状态,如何去掉这些沉淀呢,我们总结了一下血清沉淀融化“三步曲”。
步:室温90min或者15-20°C水浴18min。
第二步:20°C水浴25min。
第三步:37°C水浴35min。
如果内有头皮屑絮状沉淀,说明脂蛋白和纤连蛋白析出,不会影响细胞培养状态。
假设细胞培养每代传代时间超过正常传代时间,有可能细胞培养过程中受到了污染或致电技术咨询。
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