FlowSight 多位全景流式细胞仪

       作为流式史上的突破，默克密理博旗下Amnis公司推出的FlowSight显微成像流式细胞仪终于让流式细胞仪睁开了“眼睛”。它不仅能够获得大量细胞的群体分析数据，而且还能够实时看到细胞图像，让每一步的分析结果都可以通过图像进行确认。因此，它被生物通广大读者评为“2011生命科学十大创新产品”之一。

FlowSight是下一代专家级流式细胞仪

        FlowSight是一款体积小巧，但是功能强大的下一代专家级流式细胞仪。该系统革命性地设计提高了信噪比以及荧光检测的灵敏度。标配12个检测通道，除了传统荧光强度信息，还能获得“每个细胞”的明场、暗场以及10个荧光图像。FlowSight可以Z多配置四根激光管（405, 488, 561, 642 nm），并加配785nm激光器专用于SSC信号检测，同时还可配置96孔板自动上样系统（AutoSampler）。

无与伦比的荧光灵敏度

        FlowSight具有低于10MESF的超高检测灵敏度，特别对于弱信号的检测，有明显的优势。下图直方图数据表明FlowSight能清楚分辨出Spherotech 8-peak calibration bead在FITC到Cy7通道上所有不同荧光强度微珠的荧光强度峰值。即使用小于5%的荧光强度激发，FITC和PE通道也具有杰出的荧光强度分辨能力。而红色（PE-Cy5）和远红外（PE-Cy7）通道对荧光峰值的分辨能力更是超过目前特好的流式细胞仪。

白细胞五类分群

      FlowSight在混合细胞样品分群方面具有的表现。右图中应用CD45和SSC作图，可以清楚地把人外周血单个核细胞（PBMC）区分成5个细胞群。

专用的785nm散射光激光激光器可以清晰的将嗜酸性粒细胞和噬中性粒细胞区分开。

八色免疫荧光

        FlowSight是将流式细胞仪和12通道图像检测结合起来的仪器。多检测通道的搭配，更多的激光器选择以及自动荧光补偿功能，使复杂的细胞分群变得更加简单。

细胞周期细化分析

        细胞周期分为间期（G1、S和G2）和有丝分裂期（细胞分裂阶段，M）。M期又分为前、中、后、末期。细胞周期分析是流式细胞术Z常见的应用之一。FlowSight只要利用DAPI染料标记核酸，根据DNA的凝集情况就可以利用细胞图像对细胞周期进行精确分析；同时突破传统流式的应用限制，进一步将M期分为四期。

细胞坏死和凋亡的区分

      传统的流式细胞仪利用膜渗透性染料识别已经死亡和发生凋亡而失去膜完整性的细胞。但是，很难确定细胞死亡是通过凋亡的途径还是坏死。而FlowSight通过分析每个细胞核差异，可以解决这个问题如下图所示PI标记的THP-1细胞，坏死的细胞维持完整的细胞核状态而凋亡的细胞则出现皱缩和破碎现象。

图形量化分析应用

核转移的细胞信号检测

      图形量化分析功能升级后包含核转位程度的检测向导，可以识别任意标记的信号分子在细胞质和细胞核之间的转位过程。右图的例子展示了转录因子NF-κB（绿色）从细胞质到细胞核（橘红色）转位的过程。对照细胞（左列）NF-κB主要定位在细胞质，核转位数值为阴性。激活的细胞（右列）NF-κB主要定位在细胞核，核转位数值为阳性。

细胞自噬

      细胞发生自噬时，作为标记物的细胞质LC3蛋白经过加工在自噬小体膜上大量聚集。利用IDEAS软件中的形态学参数——Bright Detail Itensity，能够定量的衡量LC3-RFP荧光聚集的程度，从而对细胞状态进行量化分析。如图所示是饥饿引起的细胞自噬现象。正常细胞的自噬程度较低、LC3-RFP聚集程度低（左图），当收到外界因素，比如饥饿（右图）、生理压力、药物或者感染等刺激时，自噬程度会显著提高、自噬小体产生，导致LC3-RFP聚集程度上升（右图）。

图形量化分析功能

量化的图像分析加速您的科学发现

      图像量化分析功能（QI）升级包括光学系统、计算机系统和软件系统的强化，大大提高了FlowSight图像获取和分析能力。同时QI也整合了功能强大而且直观的图像处理包，内含超过百种量化分析参数和多种基于图像分析应用的优化分析向导，应用于核转位、形变、内吞、细胞凋亡等分析。