蔗糖合成酶（合成方向 SS-Ⅱ）生化测试盒

蔗糖合成酶（合成方向；SS-Ⅱ）试剂盒说明书

       微量法 100 管/48 样 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义 蔗糖是源（叶片等）光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶（Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13）是双向反应酶，既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解，是蔗糖代谢的关键酶之一。 研究其合成方向 SS-Ⅱ的活性对于植物蔗糖合成具有重要意义。 蔗糖合成酶（合成方向 SS-Ⅱ)生化测试盒

测定原理 SS-Ⅱ催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖，蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变 化，在 480nm 下有特征吸收峰，酶活力大小与颜色的深浅成正比。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰 试剂的组成和配制 提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 2.5mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂二：1000μg/mL 蔗糖溶液 10mL×1 瓶，4℃保存； 试剂三：液体 2mL×1 瓶，4℃保存 试剂四：液体 25mL×1 瓶，4℃保存； 试剂五：液体 6mL×1 瓶，4℃保存； 样品测定的准备： 按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 测定步骤 1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 480nm，蒸馏水调零。 2、样本测定，（在 EP 管中依次加入下列试剂）： 试剂名称（μL） 测定管 对照管 标准管 空白管 样本 10 10 蒸馏水 45 45 55 试剂二 10 试剂一 45 混匀，25℃准确水浴 10min 试剂三 15 15 15 15 沸水浴中煮沸 10min 左右（盖紧，以防止水分散失），冷却 试剂四 210 210 210 210 试剂五 60 60 60 60 混匀，沸水浴 30min，冷却后，取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中，480nm 下测 定各管吸光值。标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管 蔗糖合成酶（合成方向 SS-Ⅱ)生化测试盒