EoL-1细胞,人类嗜酸性粒细胞性白血病细胞株
细胞代号: | |
细胞名称: | EoL-1细胞,人类嗜酸性粒细胞性白血病细胞株 |
组织来源: | | haematopoietic_and_lymphoid_tissue |
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对应疾病: | | |
生长特性: | |
细胞来源: | 从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
培养条件: | 培养基: DMEM +10%FBS 气相:空气95%,二氧化碳5% 温度:37℃ |
培养: | 一、贴壁细胞 1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代; 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,次传代比例为1:2。 3传代步骤:将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为消化时间,记录消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。 二、悬浮细胞 1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清; 2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基); 3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。 |
细胞总数: | 1~3*106 |
传代周期: | 2-3天 |
传代比例: | 1:2~1:4 |
换液频率: | 2-3天 |
冻存液: | 90%FBS+10%DMSO |
注意事项:
1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于一周内与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。
5 因细胞产品的特殊性,如客户对本公司细胞质量存有疑问,请于收到细胞后1月内与本公司销售联系,超过时间段,本公司则默认细胞质量优良,不承担因细胞产生的任何责任。
Noverse细胞库建立有标准化GMP细胞培养车间,保藏细胞种类2000余,从来源、引进、培养、冻存、复苏、运输,注重每一个环节,提供活力强,代数靠前,优质细胞株细胞系。
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