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细胞名称:SNU-899人鳞状细胞癌|SNU-899细胞
SNU-899人鳞状细胞癌
【细胞缩写】 HBVP人脑血管周细胞
【背景资料】 见细胞说明书
【细胞来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外大学建系
【代次】 P4
【规格】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
【细胞数】 1*10(6)
【生物安全级别】 1
【生物体】 人
【组织来源】 骨骼肌
【细胞形态】SNU-899人鳞状细胞癌
【细胞特性】 贴壁
【细胞活力】 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【细胞检测】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【培养条件】 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 请具体查阅相关发表文章
接收后的操作流程与注意事项:
1、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决
2、贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养
3、生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,SNU-899人鳞状细胞癌|SNU-899细胞成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min)
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
CCL-256 NCI-H2126 Cells ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、SNU-899人鳞状细胞癌来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!
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人正常细胞
2BS 人胚肺二倍体细胞
293(HEK-293;HEK293)人胚肾细胞
293 Ad5人原胚肾转化细胞
2V6.11人胚肾细胞
BEAS-2B人正常肺上皮细胞
Caco-2人结直肠腺癌细胞
Caov-3人乳头状卵巢腺癌细胞
C918人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞
CNLMG-B5537SKIN 人类成纤维细胞
CNLMG-B5538LC 人永生化淋巴细胞
CNLMG-B5538SKIN 人类成纤维细胞
CCC-ESF-1人胚皮肤成纤维细胞
CCC-HB-2人胚膀胱组织来源细胞
CCC-HBE-2人胚气管组织来源细胞
做细胞实验的同学看过来。原装ATCC细胞现货来啦。
选择上海素冉生物细胞有3个理由:
1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;
2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;
3、使用我司推荐的进口品Pai血清进行培养实验,效果更佳。
专业技术人员李工收藏的细胞培养小技巧:
1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天蕞好更换一次培养基。
3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。
细胞培养常见问题及解决方法
问题 | 原因 | 解决方案 |
细胞生长缓慢 | 生长培养基使用不当 | 按照生产商的建议,使用相应的预热生长培养基。 |
生长培养基中血清质量差 | 使用其他批次血清。 |
传代操作不当 | 按照生产商的建议消化时间及传代比例进行操作。 |
换液过于频繁 | 降低换液频率,参考生产商推荐的换液频率。 |
细胞传代次数过多 | 使用传代次数较少的健康细胞。 |
细胞生长超过汇合状态 | 哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行,建议细胞密度达 80-90%传代。 |
细胞被支原体污染 | 将细胞、培养基和试剂丢弃;新取一只冻存细胞,并且使用新的培养基和试剂。 |
细胞复苏存活率低 | 细胞冻存不当 | 新取一只冻存细胞,并储存在液氮中。将细胞储存在液氮中,直至复苏。 |
自行制备的冻存细胞无活性 | 将细胞按照生产商推荐的密度冻存。 |
制备冻存细胞时使用传代次数少的细胞。 |
严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞。请注意本手册推荐的冷冻程序是冻存细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。 |
新取一只冻存细胞。 |
细胞复苏方法不当 | 严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞。请注意本手册推荐的解冻程序是复苏细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。 |
确保冷冻细胞解冻迅速,接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。 |
复苏培养基使用不当 | 使用生产商推荐的培养基。确保培养基使用前已经预热。 |
细胞稀释过度 | 按照生产商的建议,将解冻后的细胞高密度接种,以改善复苏效果。 |
处理细胞时动作不够轻柔 | 冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影 响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外),也不要高速离心细胞。 |
冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光 | 如果未避光储存,冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质;新取一只冻存保护剂,重新冻存细胞。 |
★由于细胞库现有细胞类目多,为了不出现混乱错误,需要了解相关细胞价格及详细资料直接call,对您造成的不便还请见谅!
★注:如运输过程中导致细胞污染或者死亡,我们将无条件补发
收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
,通过低温保藏储备一些细胞,以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象,或常规检测呈阳性结果,那么Z可靠的补救措施是扔掉所有培养物,清洁培养箱和超净台,一切从头开始。当然,你得确保储备的细胞是不含支原体的。