HO-8910人卵巢癌细胞 |HO-8910细胞

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细胞名称 HO-8910人卵巢癌细胞 |HO-8910细胞

生长特性 贴壁生长

形态特性 上皮样

产品规格 1×10^6 cells/瓶

培养条件 MEM+10%FBS+1%P/S

生长条件 气相：5%CO2  95% 空气   温度：37 ℃

冻存条件 90%FBS+10%DMSO

背景资料 Z初认为这个细胞源自喉上皮癌，但随后通过同功酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现，起源细胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。

HO-8910人卵巢癌细胞 |HO-8910细胞常规说明：

冻存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液

细胞质检情况：不含细菌、真菌、支原体等微生物污染

传代建议：1:2~1:3传代，2~3天换液1次

特别提醒：签收细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请务必重视。

一、 细胞复苏

1. 把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。

3. 把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。

4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。

5. 3天换一次培养基。

二、HO-8910人卵巢癌细胞传代

1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。

2. 把原有培养基吸掉。

3. 加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。

4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。

5. 用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。

6. 把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。

7. 倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。

8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。

三、HO-8910人卵巢癌细胞冻存

把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。

冻存液的配制： 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。

要注意的就是无菌操作！

HO-8910人卵巢癌细胞死亡是细胞衰老的结果，是细胞生命现象的终止。包括急性死亡（细胞坏死）和程序化死亡（细胞凋亡）。细胞死亡Z显著的现象，是原生质的凝固。事实上细胞死亡是一个渐进过程，要决定一个细胞何时已死亡是较困难的。除非用固定液等人为因素瞬间使其死亡。那么，怎样鉴定一个细胞是否死亡了呢？通常采用活体染色法来鉴定。如用中性红染色时，生活细胞只有液泡系染成红色，如果染料扩散，细胞质和细胞核都染成红色，则标志这个细胞已死亡。

HO-8910人卵巢癌细胞凋亡（apoptosis）是一个主动的由基因决定的自动结丛生命的过程，所以也常常被称为程序化细胞死亡（programmed cell death,PCD）。凋亡细胞将被吞噬细胞吞噬。这一假说是基于Hayflick界限提出的：1961年Hayflick根据人胚胎细胞的传代培养实验提出。指细胞在发育的一定阶段出现正常的自然死亡，它与细胞的病理死亡有根本的区别。细胞凋亡对于多细胞生物个体发育的正常进行，自稳平衡的保持以及抵御外界各种因素的干扰方面都起着非常关键的作用。例如：蝌蚪尾的消失，和肠的细胞凋亡，脊椎动物的神经系统的发育，发育过程中手和足的成形过程。
细胞的常规观察：
细胞接种或传代以后，实验者每天或至多间隔1～2d，要对细胞做常规性检查。观察细胞形态和生长情况以及培养的pH变化、有无污染等。根据细胞动态变化，做换液或传代处理，如发现异常情况应及时采取措施。
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细胞培养常见问题及解决方法

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，通过低温保藏储备一些细胞，以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象，或常规检测呈阳性结果，那么Z可靠的补救措施是扔掉所有培养物，清洁培养箱和超净台，一切从头开始。当然，你得确保储备的细胞是不含支原体的。