产品名称:小鼠杂交瘤细胞B6y H4 |B6y H4 小鼠的细胞
- 细胞数量: 1*10^6
- 细胞种属: 小鼠源
- 生长特性: 贴壁
- 培养基: DMEM-H
- 形态特征: 成纤维细胞样
- 传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
- 培养条件: 胎牛血清至浓度为10%。环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;温度,37℃
- 细胞描述: 亲本L的亚克隆,是建立的连续传代细胞之一,L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+,HPRT+。
- 细胞冻存: 液氮冻存(冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO)
- 细胞运输: 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25瓶)
小鼠杂交瘤细胞B6y H4 |B6y H4 小鼠的细胞
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细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;B6y H4说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞己证明被支原体污染,可作为细胞支原体检测试验用阳性对照细胞。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C7
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
小鼠杂交瘤细胞操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
小鼠杂交瘤细胞注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
小鼠杂交瘤细胞美国菌种保藏ZX, 又称美国模式菌种收集ZX(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上Z大的生物资源ZX,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源ZX。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
Bordet-GengouAgarMedium
MacConkey Agar incubation media MacConkey Agar
肠膜明串珠菌 产生右旋糖酐,做临床输液用 支/瓶
BoltonBroth
BPLSAgar
Bordet-GengouAgarMedium
MacConkey Agar incubation media MacConkey Agar
肠膜明串珠菌 产生右旋糖酐,做临床输液用 支/瓶
BoltonBroth
BPLSAgar
肉汤培养基250g用于初次分离细菌的增菌培养
糖发酵基础肉汤 Bromcresol Purple Broth Base 适用于微生物检验中各种糖发酵实验,无菌加入各种糖醇类物质(SN标准)
SCHAEDLER厌氧菌琼脂 SCHAEDLER Agar 250克 厌氧菌的分离培养
亚碲酸钾血琼脂基础250g/瓶用于白喉杆菌的分离培养,需添加亚碲酸钾及羊血incubationmedia亚碲酸钾血琼脂基础250g/瓶用于白喉杆菌的分离培养,需添加亚碲酸钾及羊血
EnterococcusBroth
小鼠环孢素A(CsA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒
humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgAELISA试剂盒人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物同还原酶(aldo-ketoreductase)总活性比色法定量检测试剂盒20次
Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二磷酸尿核苷葡糖酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人细胞分裂周期基因(CDC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猪骨形成蛋白2(BMP-2)免疫试剂盒 Pig Bone Morphogenetic Protein 2,BMP-2 ELISA Kit
Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISA试剂盒人苯丙酸诺龙/苯丙酸去甲睾同(NP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织总胆固醇酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
HumanFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit人游离睾同(F-TESTO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠杂交瘤细胞;B6y H4说明书兔阿霉素(ADR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human insulin-like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒
Humanai-typhusaibodyELISAKit 人抗斑疹伤寒抗体(ai-typhus-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISA试剂盒人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T