HM47 链球菌乳胶凝集试剂盒-试剂耗材

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经营范围：国家标准物质、进口标准品、冶金标样、标准气体、药典对照品、标准菌种、实验室耗材、试剂盒

产品信息：链球菌乳胶凝集试剂盒-试剂耗材

标准名称：链球菌乳胶凝集试剂盒-试剂耗材

产品详情：

　HM47 链球菌乳胶凝集试剂盒

　　一、用途

　　HKM®链球菌乳胶试剂盒用于对选择性平板上分离出的可疑链球菌以Lancefield方法进行A、B、C、D、F和G分群。

　　从感染链球菌病人分离出的大部分链球菌具有特异性血清群抗原。鉴定这些菌株包括从培养物中提取和鉴定这些特异性抗原。链球菌分群系统试剂盒内有可快速提取碳水化合物抗原的酶试剂和可快速鉴定提取出的A、B、C、D、F和G特异抗原的系列乳胶试剂。

　　该试剂盒仅供专业人员使用。

　　二、原理

　　试剂盒内乳胶试剂颗粒表面包被与链球菌A、B、C、D、F或G群碳水化合物抗原分别具有特异性的兔抗体。

　　从平板上分离的可疑链球菌菌落经酶试剂培养以提取抗原，提取出的抗原在检测板用6种分别含有一种A、B、C、D、F或G特异性抗体的乳胶试剂悬液测试，如果存在某抗原，其对应的乳胶颗粒会凝集，而其它乳胶试剂则保持光滑状态。

　　使用说明书

　　检测板

　　搅拌棒

　　需要的其它材料

　　l 接种环

　　l 塑料或玻璃试管

　　l 可分装0.4mL容积的移液器

　　l 37℃水浴锅

　　l 样品滴管或移液管

　　l 实验室计时器

　　四、警告和注意事项

　　1、试剂仅供体外诊断使用。

　　2、不要使用过期产品。

　　3、不要造成试剂或样品的交叉污染。

　　4、按说明书使用试剂盒。

　　5、不要用嘴吸取试剂或样品。

　　6、所有临床样品及其培养物均应遵循按潜在传染性产品的处理程序。被污染的物品可用3%的次氯酸钠消毒处理30分钟。含酸的废液应作中和处理。

　　五、贮存

　　检测试剂盒不使用时应贮存在2～8℃，不要冻存。在这种条件下，可保证包装盒内的产品在有效期内的有效性。

　　试剂盒内酶提取试剂在加水溶解后，2～8℃保存时，可使用3个月。如需延长保存期，可在溶解后每支试管分装0.4mL，在-20℃或更低的温度下冻存可使用6个月。酶试剂不可重复解冻和冻存。

　　显示变质的迹象

　　出现下列情况时，产品可能失效：

　　l 乳胶试剂出现明显结块，并且强烈摇动几秒钟后无法消除。

　　l 阳性对照试剂或酶试剂出现絮状或沉淀

　　l 在规定时间内，阳性对照试剂与1个或几个乳胶试剂反应不出现凝集现象。

　　l 未接种的酶试剂与乳胶试剂出现凝集反应。

　　不要使用发生变质迹象的产品。

　　六、样品及其准备

　　试剂盒用于检测在培养基上经过夜培养的可疑链球菌菌落。对于样品收集及处理、接种及培养用的培养基可参考相关资料。检测的可疑菌落可选取平板上初步分离的培养物或再次转接的新鲜纯培养物。不可直接检测保存的菌株。溶血特性是鉴定分析中的一个重要特征，是否作溶血性鉴定分析取决于检测的可疑菌落是否来自血基础培养。

　　七、检测过程

　　质量控制：

　　应定期作阳性对照测试，以确证检测试剂的有效性。

　　在测试过程中，应准备好阳性对照试剂，并代替用酶试剂制成的菌悬液进行测试。阳性对照试剂应与所有的乳胶试剂形成凝集反应。如果未出现凝集表明试剂失效。

　　如果需要作阴性对照检测，可用不加培养物的酶试剂代替用酶试剂制成的菌悬液进行测试。

　　测试程序：

　　1、所有试剂在使用前应达到室温。

　　2、在使用前，加10mL蒸馏水溶解酶试剂。轻轻摇动，以溶解均匀。每个试管中分装0.4mL酶提取液。

　　3、用接种环从平板中挑取可疑的链球菌菌落加入酶溶液中，制成菌悬液。为保证检测结果，至少应取4-5个常规大小的菌落或相当的接种量。酶溶液中接种量过多时，可引起非特异性凝集(如13.1.3)。如果菌落微小，应洗脱大量菌落。

　　4、将试管置37℃水浴锅中恒温10～15分钟。恒温5分钟时，应摇动试管。在检测前应充分振摇试管，以获得均匀的抗原悬液。

　　5、在使用前，摇动乳胶试剂以形成均匀的悬浮液。然后将各种已摇匀的乳胶试剂分别各滴1滴在6个不同的反应环内。

　　6、分别在6个已滴加乳胶试剂的反应环内滴加1滴酶提取液(或阳性对照试剂，见“对照”部分)

　　7、分别用不同的搅拌棒混匀反应环内的2滴试剂，并在整个反应环内涂布均匀。不要用同1支搅拌棒混匀不同反应环内的溶液。

　　8、轻轻摇动检测板1分钟上，以充分混合环内的溶液。

　　9、观察并记录凝集结果，如果存在链球菌，应会形成肉眼可见的明显凝集。

　　八、结果判断

　　在1分钟的反应时间内，如果形成肉眼可见的凝集，表明菌悬液是阳性。如果提取物中抗原浓度较高，可快速形成大块凝集颗粒，如果菌悬液提取物中抗原浓度较低，凝集所需时间较长，凝集的颗粒会较小。但阳性和阴性反应结果区别依然较明显。

　　如果乳胶试剂保持原来的光滑乳状，无明显凝集，说明菌悬液是阴性。如果有不明显的微弱凝集，应忽略，判断为阴性。

　　预期结果

　　β-溶血的菌落：

　　1、单个乳胶试剂凝集表明该菌株鉴定为相应的血清群。

　　以下情况应考虑增加其它的验证试验：

　　l 对于D群菌株，应做生化鉴定分析以区分D群链球菌菌株与D群肠球菌(其对抗生素有较高的抗性)。

　　l 对于菌落微小的A、C或G群菌株，应做生化鉴定以证实为S.milleri或咽峡炎链球菌。

　　2、多个乳胶试剂凝集，表明不同群的多个菌落混合生长，或单一菌株有多个群的抗原(如D群链球菌同时含有G群抗原)。可以进一步考虑下列实验：

　　l 进一步分离培养以获得纯菌落重新进行测试。

　　l 同时含有D群和G群抗原的菌株应进一步做生化鉴定以区分肠球菌与D群链球菌菌株(含两种抗原的肠球菌可能比只含有D抗原的菌株对抗生素抗性更强)。

　　3、所有乳胶试剂均凝集，可能是加入酶溶液中的接种物过多，或测试的培养物有污染菌株引起非特异性凝集，(一般情况下，可以通过识别菌落特征以确认)。可以进一步考虑下列实验：

　　l 使剩余的酶提取物沸腾2～3分钟上，冷却后进行重新测试，可能得到清晰的结果。

　　l 减少酶溶液中的接种物，重新测试。

　　l 进一步分离培养，获得纯菌落重新进行测试。

　　4、乳胶试剂均无明显凝集，测试样品中可能无A、B、C、D、F或G群链球菌存在，或存在的数量低于检测限。可以进一步考虑下列实验：

　　l 使用较多接种物重新进行测试，特别在怀疑是链球菌D群或F群的情况时。

　　l 未得到分群结果的β-溶血链球菌，必要时用生化实验进行鉴定分析。

　　非β-溶血的菌落：

　　如果出现单一的乳胶凝集结果显示为B群或D群，可较好的表明菌株所鉴定的结果。如果结果显示为A、C、F或G群，则不能说明菌株为所鉴定的结果，应采用其它鉴定方法。

　　可以考虑增加以下程序：

　　l 如果结果显示为D群，应做进一步的生化鉴定以区分肠球菌与D群链球菌。

　　其它相关结果应参考以上信息进行判断。

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