凝胶过滤填料— 嗜脂性葡聚糖凝胶LH-20——适合天然产物的纯化,特别是嗜脂性分子纯化及制备葡聚糖凝胶是通过表氯醇交联多个葡聚糖得到的。葡聚糖凝胶 G-10、G-25这些葡聚糖凝胶是在水溶液中使用,若要用有机溶剂做为流动相。只有通过羟丙基化将葡聚糖凝胶 G转化为可在有机溶剂中溶胀的葡聚糖凝胶。这时的产品为葡聚糖凝胶 LH-20或LH-60。 层析原理:l 凝胶过滤:依赖于分子的大小和形状l 吸附层析:依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键数量和质量l 分配层析:依赖于分离化合物在流动相(溶剂)和固定相(凝胶)之间的分配,这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。葡聚糖凝胶 LH-20层析:葡聚糖凝胶 LH-20的分离原理主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,后出柱。如果使用反相溶剂洗脱,葡聚糖凝胶 LH-20对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。
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