人肺粘液上皮样癌细胞;NCI-H292图片本公司专业代理ATCC细胞,提供售前售后服务,若要获取详细的说明书或价格信息,请。
细胞名称 人肺粘液上皮样癌细胞;NCI-H292图片
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 此细胞株源自肺粘膜上皮细胞癌的淋巴结转移灶。 这个细胞系用化学合成培养基分离得到,并转换成含血清培养液培养。 此细胞在培养时在亚显微结构上保留了粘膜上皮细胞的特性,并表现出鳞状分化的多种标记。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:
2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:11,12;D16S539:9,13;D18S51:16;D19S433:12,13.2;D21S11:28;D2S1338:21,24;D3S1358:16;D5S818:13;D7S820:10;D8S1179:11,14;FGA:22,26;TH01:8;TPOX:8,11;vWA:16,17
同工酶
染色体
使用权限 A类
操作流程:
※主要试剂与仪器:倒置相差显微镜),co2孵箱。
※细胞的复苏培养传代及冻存:
▷细胞的复苏培养:从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,同时不断摇动使之迅速融化,然后用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
▷细胞传代:原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
▷细胞形态的观察:在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
▷生长曲线:取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
▷细胞的贴壁率:指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
▷细胞的计数:常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
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