西尼罗河热IgG抗体检测试剂盒(ELISA法)
广州健仑生物科技有限公司
检查
1.实验室检查
白细胞数减少,脑炎型者脑脊液中淋巴细胞增多,蛋白ZG。
2.免疫学检查
利用血清学抗体检测方法,常用ELISA(酶联免疫吸附实验)法,采用患者急性期和恢复期双份血清,两份血清同时进行检测,以恢复期血清较急性期特异性IgG抗体滴度升高4倍以上为阳性,有助于本病的诊断。
3.病原学检查
自潜伏末期至发病后第5天,从患者血液或脑脊液中分离出病毒,阳性率较高,对新分离病毒的鉴定一般采用已知血清进行中和实验。
4.分子生物学检查
RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)法检测,通过设计西尼罗河热病毒特异引物对血清或脑脊液标本进行RT-PCR试验,阳性率高,具有特异性诊断价值。
用途
西尼罗(WN)病毒IgG ELISA,利用了西尼罗重组抗原检测人体血清或血浆中的西尼罗抗体。本实验仅用于辅助诊断人感染了西尼罗病毒,不用于筛查血液或血液成分。仅供专业人员体外诊断使用。
概述
感染了西尼罗病毒会导致包括脑炎等一系列症状的疾病,西尼罗病毒在世界广泛传播,已在50多个国家检测出该病毒。本试验经CDC提供的试剂检验与验证。本试验使用了一种称为WNRA的重组抗原,它可以作为西尼罗病毒感染的快速血清学指标,WNRA蛋白是一种重组抗原,它是由含有西尼罗病毒两个抗原的序列多肽构成。
实验的原理
检测西尼罗病毒IgG ELISA 是基于两步夹心法原理制造的。
提供的材料
- 微孔板(96孔 12x8):即用 每孔均包被结合西尼罗重组抗原的单抗。2-8℃下保存至保质期。
注意:WNRA和NCA已包被于微孔板。
- IgG样品稀释液:1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- IgG阴性质控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要长时间储存,将其分装于小瓶里,在-70℃下储存。
- IgG阳性质控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要长时间储存,将其分装于小瓶里,在-70℃下储存。
- 洗涤液(10X):1瓶 120ml 2-8℃下保存至使用。
- EnWash:1瓶 20ml 2-8℃下保存至使用。
- 酶联物:一瓶6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- TMB底物液: 1支 9ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- 终止液;1支6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
试剂应避免反复冻融。
西尼罗河病毒IgG、IgM联合诊断试剂盒
西尼罗河病毒IgG、IgM联合诊断试剂盒
西尼罗河热IgG抗体检测试剂盒(ELISA法)
操作步骤:
- 标记将要使用的板条,注意微孔板已经按照统一排列,如下所述包被西尼罗抗原和质控抗原。
西尼罗抗原 | |
板条#1 | 板条#2 |
A | WNRA | WNRA |
B | WNRA | WNRA |
C | WNRA | WNRA |
D | WNRA | WNRA |
E | NCA | NCA |
F | NCA | NCA |
G | NCA | NCA |
H | NCA | NCA |
- 将血清样品﹑阴性质控和阳性质控同样地用样每孔加入50ul稀释后的样品,以下为一个血清样品使用一个板条的典范。
- 品稀释液按1:300稀释。
| 板条1 | 板条2 |
血清样品 |
A | IgG N | 样品1 |
B | IgG N | 样品1 |
C | IgG P | 样品2 |
D | IgG P | 样品2 |
E | IgG P | 样品2 |
F | IgG P | 样品2 |
G | IgG N | 样品1 |
H | IgG N | 样品1 |
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这一效率可以相差若干个数量级, 它起决于:a.受体细胞的型别(即使同一细胞系,克在化 脓性球菌中,肺炎链球菌的致病力仅次于金黄色葡萄球菌 。不同的是,到目前为止,肺炎链球菌极少对青霉素类抗 生素产生耐药性。肺炎球菌主要的致病物质是肺炎球菌溶 血素及荚膜。荚膜具有抗原性,是肺炎链球菌分型的依据 。此菌可引起大叶性肺炎、脑膜炎、支气管炎等疾病。生 物学性状编辑肺炎链球菌电镜下的形态肺炎链球菌电镜下 的形态⒈菌体呈矛头状,多成双排列,宽端相对,相 背,有较厚荚膜,革兰阳性.⒉培养特性和生化反应 营养 要求及在血平板上菌落特征基本同甲型链球菌,培养时间 稍久菌落ZY下陷呈脐窝状.在血清肉汤中培养稍久亦因细 菌自溶而使混浊的培养液渐变澄清.自溶酶可被胆汁或胆盐 等物质活化,加速细菌溶解,故可用胆汁溶菌试验与甲型 链球菌相区别;肺炎链球菌能分解菊糖这点也可作为与甲 型链球菌相区别的依据.⒊抗原结构与分型⑴荚膜多糖抗原 按此抗原不同分为84个血清型,个别型还可分成不同的亚 型.其中有20多个型可引起疾病.