小鼠网织细胞性白血病细胞;L615价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 小鼠网织细胞性白血病细胞;L615价格
形态特性 淋巴母细胞样
品Pai 悬浮生长
特征特性 L6565细胞源自L6565白血病小鼠的脾细胞胰悬液。染色体数从38到144不等。电镜观察证明L6565克隆细胞核边界清晰,细胞质中oragnalles和A类C类病毒颗粒丰富。 c-myc和c-fos过量表达。 L6565细胞克隆是一株含有RNA病毒的淋巴细胞白血病干细胞。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 1:
2。3天内可长满。
传代情况 PN
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-Sema3A/FITC 荧光素标记臂板蛋白3A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌动蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
胃粘液素抗体 anti-MUCC/Mucin C 0.1ml
STAC 英文名称: STAC1蛋白抗体 0.2ml
FLG 英文名称: 丝聚合蛋白/中间丝蛋白抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Paxillin(Ser83) 磷酸化桩蛋白Paxillin抗体 规格 0.1ml
Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌动蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
pMHC(Human peptide major histocompatibility complex) ELISA Kit 人肽-主要组织相容性复合体复合物Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-secretory IgA 分泌型免疫球蛋白A抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh H1N1 Matrix Protein 2/Influenza A bp1 A型猪流感病毒H1N1-M2蛋白抗体 规格 0.2ml
Y-GT(Rat) ELISA Kit 大鼠Y-谷酰转肽酶 96T
OAT-3 英文名称: 阴离子转运蛋白-3抗体 0.1ml
BOLA1 英文名称: BOLA1蛋白抗体 0.2ml
Anti-secretory IgA 分泌型免疫球蛋白A抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
SV2A 英文名称: 突触泡蛋白2A抗体 0.2ml
FREAC3 英文名称: 叉头相关转录因子3抗体 0.1ml
瘦素抗体 Anti-Leptin 0.2ml
anti-RAP1A/FITC 荧光素标记抗Rap1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗体 规格 0.1ml
Beta-Amyloid (1-42) β淀粉样肽(1-42)(多肽蛋白)Multi-class antibodies规格: 0.1mg
IL-6 ELISA KIT 大鼠白介素6Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-Bad(Ser112) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化相关死亡促进因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ETS1 associated protein II/EAPII ETS1相关蛋白2抗体 规格 0.1ml
BMP-4(Mouse Bone morphogenetic protein 4) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白4 96T
Phospho-MYPT1 (Ser668) 英文名称: 磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗体 0.1ml
AT2R 英文名称: 血管紧张素Ⅱ受体1抗体 0.1ml
Anti-Phospho-Bad(Ser112) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化相关死亡促进因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml