人宫颈癌多药耐药细胞；SiHa/cDDP培养

细胞名称  人宫颈癌多药耐药细胞；SiHa/cDDP培养
形态特性 上皮细胞样

品Pai 贴壁生长

特征特性 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

传代方法 1：

3传代，3-4天传1次  

传代情况 C2

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR

同工酶

染色体

使用权限 未定
人宫颈癌多药耐药细胞；SiHa/cDDP培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml完全培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-HSP-90 Beta /HRP 辣根过氧化物酶标记热休克蛋白90β抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

pig IgM (亲和纯化) 猪IgMMulti-class antibodies规格： 1mg

人类白细胞抗原G/组织相容性白细胞抗原G抗体 Anti-HLA-G 0.1ml

Rabbit Anti-Biotin 兔抗生物素抗体IgG 0.2ml

F1 protein (YERSINIA PESTIS) 英文名称： 鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原F1单克隆抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-RGS19(Ser151) 磷酸化G蛋白信号转导调节因子19抗体 规格 0.1ml

pig IgM (亲和纯化) 猪IgMMulti-class antibodies规格： 1mg
sLOX-1(Human Soluble Lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1) ELISA Kit 人可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Morphine 单克隆抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh KCNG4/KV6.3 钾离子通道蛋白G蛋白4抗体 规格 0.2ml

PRL ELISA Kit 大鼠催乳素 96T

PPO 英文名称： 儿茶酚氧化酶PPO抗体 0.2ml

AVSD2 英文名称： 富含半胱酸与表皮生长因子样蛋白2抗体 0.2ml

Anti-Morphine 单克隆抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Tris-Glycine SDS Running Buffer Tris-甘酸蛋白电泳缓冲液(粉剂) 1L

TRA1 variant 英文名称： 排斥抗原gp96 1 变异体抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh OCT1 阳离子转运器1抗体 规格 0.1ml

streptomycin/OVA 链霉素偶联鸡卵白蛋白Multi-class antibodies规格： 10mg

C20orf62 英文名称： 20号染色体开放阅读框62抗体 0.2ml

Anti-Phospho-CEBP alpha (Ser21) 磷酸化转录调节因子CEBP α 抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-FOXF1/FITC 荧光素标记叉头蛋白F1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-CD329/SIGLEC9/FITC 荧光素标记唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素9抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BST2/CD317 基质干细胞抗原2抗体 规格 0.2ml

Apelin36 脂肪炎症因子Apelin36 1mg

HSD11B1 英文名称： 羟基类固醇脱氢酶11β1抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh RIP5/RIPK5 受体结合丝氨酸苏氨酸激酶5抗体 规格 0.2ml

Anti-CD329/SIGLEC9/FITC 荧光素标记唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素9抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。