人原胚肾转化细胞;Trex-293价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人原胚肾转化细胞;Trex-293价格
形态特性 上皮样;多角
品Pai 贴壁生长
特征特性 该细胞在293细胞的基础上进行了改造,在含有灭瘟素的培养基中稳定表达四环素阻遏,且重组腺病毒产率高于其他细胞的产率。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS + Blasticidin
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 PN5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cortactin (Tyr466) 磷酸化皮层肌动蛋白抗体 规格 0.1ml
兔抗羊IgG-纯化抗体 1mg/10mg 国产
CHI3L2 英文名称: 软骨细胞蛋白39抗体 0.2ml
DCAF13 英文名称: DCAF13蛋白抗体 0.2ml
Anti-2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
vaspin(Mouse Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit 小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶YZ剂Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-cath-G/CG /FITC 荧光素标记组织蛋白酶G抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh eIF3A 真核翻译起始因子3A抗体 规格 0.1ml
Nasoniavitripennis vilogenin,Vtg ELISA Kit 蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原 96T
MKLP1 英文名称: 有丝分裂驱动蛋白样1抗体 0.2ml
Phospho-Ack1 (Tyr284) 英文名称: 磷酸化Ack1抗体 0.1ml
Anti-cath-G/CG /FITC 荧光素标记组织蛋白酶G抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
人谷胱甘肽过氧化物酶2(GPx-2)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠剪接因子3B亚基3(SF3B3)ELISA试剂盒,英文名:SF3B3 ELISA KiISA Kit for Human Heat shock protein beta-1小鼠蛋白激酶Bγ(PKBγ)ELISA试剂盒,英文名:PKBγ ELISA KiISA Kit for Human Involucrin小鼠WNT1诱导信号通道蛋白1(WISP1)ELISA试剂盒,英文名:WISP1 ELISA KiISA Kit for Human Kin of IRRE-like protein 1小鼠210kDa核孔蛋白(NUP210)ELISA试剂盒,英文名:NUP210 ELISA KiISA Kit for Human Laminin subunit alpha-5大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒,英文名:NOS ELISA KiISA Kit for Human Metallo-beta-lactamase domain-containing protein 1大鼠突触蛋白1(Syn1)ELISA试剂盒,英文名:Syn1 ELISA KiISA Kit for Human Mucin-1大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒,英文名:Gelsolin ELISA Kit
ELISA Kit for Human Potassium/sodium hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 4小鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR1A)ELISA试剂盒,英文名:BMPR1A ELISA KiISA Kit for Human Nuclear apoptosis-inducing factor 1大鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒,英文名:ADAM9 ELISA KiISA Kit for Human Prion-like protein doppel大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒,英文名:IP-10/CXCL10 ELISA KiISA Kit for Human Pyridoxal kinase大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒,英文名:LTB4 ELISA KiISA Kit for Human Proenkephalin-A大鼠CD19分子(CD19)ELISA试剂盒,英文名:CD19 ELISA KiISA Kit for S-Adenosyl methionine大鼠载脂蛋白F(APOF)ELISA试剂盒,英文名:APOF ELISA KiISA Kit for Human Selenium-binding protein 1大鼠铁反应元件结合蛋白2(IREB2)ELISA试剂盒,英文名:IREB2 ELISA Kit
山羊抗小鼠 IgG(H+L)/TRITC 0.1ml 红色荧光,Jackson公司分装
Phospho-Vimentin(Ser82) 英文名称: 磷酸化波形蛋白抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Bad(Ser155) 磷酸化相关死亡促进因子抗体 规格 0.1ml
MYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Dystrophin 英文名称: 肌营养不良蛋白抗体 0.1ml
Anti-Gamma-Adaptin 衔接蛋白γ抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
CA ELISA Kit 大鼠儿茶酚胺Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-V.cholera Ogawa 01群稻叶型霍乱弧菌抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GAD67 谷氨酸脱羧酶-67抗体 规格 0.1ml
5-NT(Mouse 5-Nucleotidase) ELISA Kit 小鼠5核苷酸酶 96T
NESG1 英文名称: 鼻咽上皮细胞特异性蛋白1抗体 0.1ml
phospho-ABCA1 (Ser2054) 英文名称: 磷酸化腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体 0.1ml
Anti-V.cholera Ogawa 01群稻叶型霍乱弧菌抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml