NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞
细胞产品介绍
产品编号 hce-0356
细胞名称 NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞
生长特性 贴壁生长
形态特性 上皮样
产品规格 1×10^6 cells/瓶
培养条件 RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
生长条件 气相:5%CO2 95% 空气 温度:37 ℃
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
背景资料
备注
NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞 细胞株由ThermoFly赛默飞生命科技有限公司提供。公司主营产品:细胞系,中科院细胞库,原代细胞,ATCC细胞系,抗体。
NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞 细胞株
NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞 【细胞培养】
细胞培养是当前细胞生物学乃至整个生命科学研究与生物工程中Z基本的实验技术。动物细胞培养为疫苗生产、研制与肿瘤FZ等医学实践提供了全新的手段。细胞培养包括原核生物细胞,入细菌;真核单细胞生物,入酵母菌、四膜虫等;植物细胞与动物细胞的培养以及于此密切相关的病毒的培养。
体外培养的细胞可分为原代细胞(primary culture cell)与传代细胞(subculture cell)。原代细胞是指机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养,适应在体外培养下条件下持续传代培养的细胞称为传代细胞。
分散的细胞悬液在培养瓶中很快(在几十分钟至数小时内)就贴附在瓶壁上,这就称为细胞贴壁。
分散呈圆球形的细胞一经贴壁就迅速铺展并开始有丝分裂,逐渐形成致密的细胞单层,称为单层细胞(sigle layer cell),这种培养方法称为单层细胞培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
如果漂浮的死细胞多,说明细胞有很多老化的,建议每次传代的时候,在用胰酶消化之前,用PBS将细胞漂洗一遍,胰酶消化的时间要把握好,37℃2-3min即可,及时终止反应,否则胰酶消化过度对细胞损伤较大,也会有很多死细胞出现的;吹打细胞的动作要轻柔。
体外培养的细胞,不论是元代细胞还是传代细胞一般不包吃体内原有的细胞形态。但大体可以分为两种基本形态:成纤维样细胞(fibroblast like cell)与上皮样细胞(epitbelial like cell)。此外还有一些可移动的游走细胞。
某些传代细胞还可用悬浮方法培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
此培养条件比较复杂,悬浮培养的优点是能同时获得大量细胞。
NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞 【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞 【复苏的原则】
快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞|细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。
NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞 【注意事项】
然泰生物实验室专业人士提醒广大科研实验者,购买NCI-H647 人非小细胞肺癌细胞培养,注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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