细胞培养经验总结
何谓FBS, FCS, CS, HS ?
FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思,两者都是指胎牛血清, FCS 乃错误的使用字眼, 请不要再使用。CS(calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。
培养细胞时应使用5% 或10% CO2?或根本没有影响?
一般培养基中大都使用HCO3-/CO3 2-/H+作为pH 的缓冲系统, 而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时,细胞培养时应使用10% CO2;当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时, 则应使用5% CO2 培养细胞。
Hank's 平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用,不需要CO2培养箱。原因是什么?Hank's 平衡盐溶液(HBS)和Earle's平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别?
HBS和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles (2.2 g/L)中比在Hanks (0.35 g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的PH值。Eagles液在空气水平的CO2 中,溶液会变碱,Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用Eagles液,。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用Hanks液就可以了。
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许多生物相关研究都使用细胞,但是细胞系污染和错误鉴定一直是一个普遍存在的问题,据统计约30%细胞系被交叉污染或错误辨识。因此NIH、ATCC等权威机构强烈建议在使用培养细胞的时候进行鉴定,旨在约束因细胞交叉污染和错误辨识所导致的无效科研数据的不断扩增。目前很多杂志也越来越重视细胞株鉴定,2014年12月、2015年2月Science杂志分别发表文章ZT阐述细胞交叉污染和错误辨识的严重性,2015年4月Nature通知旗下所有杂志将要求作者鉴定论文中所用细胞系。
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(编辑:tanxi)