细胞培养中有哪些要注意的问题?又该如何解决呢?
GlutaMAX-Ⅰ是什么?培养细胞如何利用GlutaMAX-Ⅰ?这个二肽有多稳定?
GlutaMAX-Ⅰ是一个L-谷氨酰胺的衍生物,其不稳定的a-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽,释放L-谷氨酰胺供利用。
GlutaMAX-Ⅰ二肽非常稳定,即使在121℃灭菌20min, GlutaMAX-Ⅰ二肽溶液有Z小的降解;而在相同条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解。
L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的,但其在溶液中不稳定,经过一段时间后会降解,确切的降解率一直没有Z终确定。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。因此GlutaMAX-Ⅰ是细胞培养中谷氨酰胺的替代品。
可否使用与原先培养条件不同的培养基?
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同的培养基,细胞大多无法立即适应,造成细胞无法存活。
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许多生物相关研究都使用细胞,但是细胞系污染和错误鉴定一直是一个普遍存在的问题,据统计约30%细胞系被交叉污染或错误辨识。因此NIH、ATCC等权威机构强烈建议在使用培养细胞的时候进行鉴定,旨在约束因细胞交叉污染和错误辨识所导致的无效科研数据的不断扩增。目前很多杂志也越来越重视细胞株鉴定,2014年12月、2015年2月Science杂志分别发表文章ZT阐述细胞交叉污染和错误辨识的严重性,2015年4月Nature通知旗下所有杂志将要求作者鉴定论文中所用细胞系。
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(编辑:tanxi)