购买国外细胞株需要考虑的因素有如下几点:1、细胞株的生物等级,由于有些细胞株及菌株属于管制品,所以从国外购货比较麻烦。2、在购买国外细胞株时,需交待国外加比较多的干冰(一般在13公斤以上,采用比较密封的泡沫盒加套纸箱)。 肺泡上皮细胞,上海然泰生物公司细胞近3000种,来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制,在ZG大陆努力搭建正Pai细胞与国内广大科研人员之间的沟通桥梁。肺泡上皮细胞外,还有更多相关实验产品,标准品,细胞株和实验技术服务等等前期后续服务。
细胞培养经验总结
如我养的平滑肌细胞很活跃,喜欢热闹,2~3 天就好多人口,而且不太爱吃喝,真是Z好养的孩子了。内皮细胞和平滑肌细胞性格相近,不过它很不讲卫生,也很邋遢,里面有很多分泌屋,要经常换洗才行。RAW264.7 细胞也很开朗,而且很能吃,要经常喂它,头疼的是细胞很容易活化,培养它的瓶子和环境没有内毒素才好,不过我这个当妈的很难满足它了。
培养前的工作准备充分
包括耗材的处理、试剂的配置,无菌检验等等。
玻璃器皿的清洗。对于玻璃器皿(细胞瓶、装营养液的瓶子、小青霉素瓶等)要先用洗衣粉刷干净(注意死角),然后冲干净。用酸液浸泡 24 h 以上,之后用清水冲洗 10 遍,除去残留酸液。瓶子之类,冲洗过程要使劲摇晃。然后在双蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎,160℃ 干烤 2 h 待用。
试剂配置。细胞培养用的液体一般使用双蒸以上的水即可。并注意 pH 值的调节。
无菌检验。主要采用过滤CJ:如胰酶、抗生素、G-418 溶液、各类培养基、丙酮酸钠、谷氨酰胺等。有些可以采用高压灭菌:如 PBS、D-Hank's等。
购买上海然泰物细胞注意事项(然泰生物)发布
一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;
收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:
1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:
1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;
3) 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。
三、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
四、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
(1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;
(2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
(3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
(4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
(5)视具体情况而定。
五、细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(4)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(5)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(6)视具体情况而定。
六、售后服务政策
Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品Pai;部分产品现货,超低比价,另常备 Trizol DMSO lipo2000 lipo3000 SC-2004 SC-2005常备现货 ;货期短,价格优,售后齐全。
细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果;细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,我们调查核实后予免费调换,不收取任何费用。
需要客户关于细胞培养说明、细胞操作处理方法、细胞质量问题反馈表。
如用户收到细胞8-30天之内,因处理不当造成细胞死亡或污染,我公司将优惠价重新提供一株原细胞
质量可靠,售后有保障
★我库细胞近3000种,来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制。
冻存细胞时间为5-7个工作日,活细胞为7-15个工作日。
★由于细胞库现有细胞类目多,为了不出现混乱错误,需要了解相关细胞价格及详细资料请老师,对您造成的不便还请见谅!
(编辑:tanxi)